Question

17．請分析回答下列有關(guān)生物技術(shù)實踐的問題：
（1）制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時，倒平板操作的步驟是：將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞；右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰；用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋；等待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下、皿底在上．
（2）稱量時，牛肉膏由于比較黏稠，可以用玻璃棒挑取，放在稱量紙上稱量．牛肉膏和蛋白胨由于易吸潮，稱量時動作要迅速，稱后要及時蓋上瓶蓋．
（3）各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，此外，還要滿足微生物生長對PH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．
（4）纖維素能被土壤中某些微生物分解利用，這是因為它們能夠產(chǎn)生纖維素酶，這種酶是一種復(fù)合酶酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，纖維素分解菌的篩選一般用剛果紅染色法，這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對微生物進(jìn)行篩選．
（5）植物的組織培養(yǎng)除需營養(yǎng)和激素外，pH、溫度、光照等外界條件也很重要．
（6）無菌技術(shù)主要通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染．常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌
（7）進(jìn)行菊花組織培養(yǎng)的基本實驗操作步驟是：制備MS固體培養(yǎng)基、外植體消毒、接種、培養(yǎng)、移栽、栽培．花藥離體培養(yǎng)時，選擇單核期的花粉能提高誘導(dǎo)成功率，確定花粉發(fā)育時期最常用的染色方法是醋酸洋紅法．花藥經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的主要成分包括：碳源、氮源、水、無機鹽等．
2、培養(yǎng)基配制時的注意事項
①全程要求無菌操作，無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還能有效地避免操作者自身被微生物感染．
②培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板．
③平板冷凝后皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，若將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染．
④在倒平板的過程中，不能將培養(yǎng)基濺到皿蓋與皿底之間的部位，因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生．
3、實驗室常用的滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌．
4、纖維素的單體是葡萄糖，纖維素酶能夠?qū)⒗w維素范圍葡萄糖．纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶．纖維素分解菌可以用剛果紅染液進(jìn)行鑒別，能夠產(chǎn)生透明圈的菌落就是纖維素分解菌．

解答 解：（1）倒平板操作的步驟：將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞；右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰；用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋；等待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下、皿底在上，這樣可以防止皿蓋上的水分滴到培養(yǎng)基上造成培養(yǎng)基的污染．
（2）稱量時，牛肉膏由于比較黏稠，可以用玻璃棒挑取，放在稱量紙上稱量．牛肉膏和蛋白胨由于易吸潮，稱量時動作要迅速，稱后要及時蓋上瓶蓋．
（3）各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，此外，還要滿足微生物生長對PH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．
（4）纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶．纖維素分解菌可以用剛果紅染液進(jìn)行鑒別，能夠產(chǎn)生透明圈的菌落就是纖維素分解菌．
（5）植物的組織培養(yǎng)除需營養(yǎng)和激素外，pH、溫度、光照等外界條件也很重要．
（6）常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和 高壓蒸汽滅菌
（7）進(jìn)行菊花組織培養(yǎng)的基本實驗操作步驟是：制備MS固體培養(yǎng)基、外植體消毒、接種、培養(yǎng)、移栽、栽培．花藥離體培養(yǎng)時，選擇單核期的花粉能提高誘導(dǎo)成功率，確定花粉發(fā)育時期最常用的染色方法是醋酸洋紅法．花藥經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比．
故答案為：
（1）棉塞  培養(yǎng)基  凝固  皿蓋  皿底
（2）玻璃棒  稱量紙  易吸潮
（3）碳源  氮源  PH  氧氣
（4）纖維素酶  復(fù)合酶  剛果紅染色
（5）pH 溫度 光照
（6）灼燒、高壓蒸汽
（7）外植體消毒  單核  醋酸洋紅法 激素的種類及其濃度配比

點評 本題綜合考查了生物技術(shù)實踐的有關(guān)知識，具有一定的綜合性，然而知識點較簡單，要求考生能夠識記培養(yǎng)基的成分、制備方法、倒平板的步驟等，識記纖維素酶的種類以及細(xì)菌鑒定的方法，再結(jié)合所學(xué)知識準(zhǔn)確答題．