Question

回答下列關(guān)于微生物的問題．
營養(yǎng)缺陷型是指野生型菌株由于基因突變，致使細胞合成途徑出現(xiàn)某些缺陷，喪失合成某些物質(zhì)的能力，如氨基酸、維生素、堿基等的合成能力出現(xiàn)缺陷，必須在基本培養(yǎng)基（野生型菌株最低營養(yǎng)要求）中添加缺陷的營養(yǎng)物質(zhì)（補充培養(yǎng)基）才能正常生長的一類突變株．基本培養(yǎng)基中加入一些營養(yǎng)物質(zhì)，可以滿足該微生物的各種營養(yǎng)缺陷型生長的培養(yǎng)基稱為完全培養(yǎng)基．營養(yǎng)缺陷型在基礎理論研究和生產(chǎn)應用中有廣泛作用．青霉素能抑制細菌細胞壁的生物合成，可用于淘汰野生型菌株．篩選營養(yǎng)缺陷型菌株一般通過四個環(huán)節(jié)，即誘變、淘汰野生型、檢出和鑒定營養(yǎng)缺陷型．
（1）取新活化枯草芽孢桿菌制備菌懸液，再用紫外線照射處理．下列關(guān)于將誘變后存活的個體培養(yǎng)，淘汰野生型菌株的做法和原理，正確的是

 

（多選）
A、培養(yǎng)在含有青霉素的基本培養(yǎng)基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株
B、培養(yǎng)在含有青霉素的補充培養(yǎng)基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株
C、完全培養(yǎng)基中青霉素可以殺死野生型菌株，缺陷型菌株得以生存
D、補充培養(yǎng)基中缺陷型菌株可以生存，野生型菌株不能生存
E、基本培養(yǎng)基中野生型可以生長繁殖，青霉素將其殺死
F、基本培養(yǎng)基中缺陷型不可以生長繁殖，青霉素不能將其殺死
（2）在培養(yǎng)皿倒上一層不含菌的基本培養(yǎng)基，待冷凝后加上一層含菌的基本培養(yǎng)基，其后再澆上一層不含菌的基本培養(yǎng)基．經(jīng)培養(yǎng)后出現(xiàn)菌落，在皿底將菌落標記為A₁、A₂…，然后在其上再倒一薄層完全培養(yǎng)基，再培養(yǎng)，出現(xiàn)新的菌落，在皿底標記為B₁、B₂…，則A菌落與B菌落分別較可能是

 

、

 

（均選填野生型/突變型）．
（3）將待測菌落處理后涂布于某培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，用滅菌牙簽逐個挑取待測菌，先后點接于A培養(yǎng)基和B培養(yǎng)基平板上．前后位置及號碼相對應．培養(yǎng)后觀察．如圖一．為檢出營養(yǎng)缺陷型，A、B培養(yǎng)基應分別為

 

培養(yǎng)基、

 

培養(yǎng)基．菌落

 

為營養(yǎng)缺陷型． 
（4）為鑒定上步檢出的營養(yǎng)缺陷型是哪種營養(yǎng)缺陷型，將待測菌種懸液涂于圖二含有基本培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿背面劃線標注C、D、E三區(qū)．C、D、E為三濾紙片，分別浸有氨基酸混合液、維生素混合液和堿基混合液．培養(yǎng)后觀察．當觀察到

 

現(xiàn)象，說明是該營養(yǎng)缺陷型．圖二培養(yǎng)基也可稱為

 

培養(yǎng)基．
（5）如檢測菌為堿基類營養(yǎng)缺陷型，要進一步鑒定是哪種堿基營養(yǎng)缺陷型，可同圖二方法加浸該營養(yǎng)物質(zhì)的濾紙片，如加浸

 

的濾紙片．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：由題意知，營養(yǎng)缺陷型是指野生型菌株由于基因突變，致使細胞合成途徑出現(xiàn)某些缺陷，喪失合成某些物質(zhì)的能力，如氨基酸、維生素、堿基等的合成能力出現(xiàn)缺陷，必須在基本培養(yǎng)基（野生型菌株最低營養(yǎng)要求）中添加缺陷的營養(yǎng)物質(zhì)（補充培養(yǎng)基）才能正常生長的一類突變株．

解答： 解：（1）營養(yǎng)缺陷型是指野生型菌株由于基因突變，致使細胞合成途徑出現(xiàn)某些缺陷，喪失合成某些物質(zhì)的能力，如氨基酸、維生素、堿基等的合成能力出現(xiàn)缺陷，必須在基本培養(yǎng)基（野生型菌株最低營養(yǎng)要求）中添加缺陷的營養(yǎng)物質(zhì)（補充培養(yǎng)基）才能正常生長的一類突變株，A、E、F正確；
（2）培養(yǎng)在含有青霉素的基本培養(yǎng)基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株，基本培養(yǎng)基中野生型可以生長繁殖，缺陷型不能生長繁殖；
（3）A、B培養(yǎng)基應分別為基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基；菌落6、8為營養(yǎng)缺陷型；
（4）當觀察到某一濾紙片周圍有菌生長的現(xiàn)象，說明是該營養(yǎng)缺陷型，圖二培養(yǎng)基也可稱為補充培養(yǎng)基；
（5）如檢測菌為堿基類營養(yǎng)缺陷型，要進一步鑒定是哪種堿基營養(yǎng)缺陷型，可同圖二方法加浸該營養(yǎng)物質(zhì)的濾紙片，如加浸腺嘌呤的濾紙片．
故答案為：（1）A  E  F
（2）野生型    缺陷型菌株
（3）基本      完全      6、8
（4）某一濾紙片周圍有菌生長    補充
（5）腺嘌呤（胞嘧啶等）

點評：本題主要考查微生物的實驗室培養(yǎng)的方法．