Question

【題目】某研究小組欲對(duì)比人手上不同部位微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：

①準(zhǔn)備工作：配置培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、．X、H2O） ，制作無(wú)菌平板。

②采樣：分別用蘸有無(wú)菌生理鹽水的棉拭子涂擦被檢對(duì)象手的手掌、手指、手背3個(gè)部位，擦完后，將手接觸部分剪去，將棉拭子放入裝有10毫升無(wú)菌生理鹽水的試管內(nèi)送檢。

③檢測(cè)：將上述樣液充分振搖，將無(wú)菌吸管分別吸取1ml待檢樣液接種于無(wú)菌平板；將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。

回答下列問(wèn)題：

（1）該培養(yǎng)基中微生物所需的碳源是_________。該培養(yǎng)基中的成分X通常是_________________。配制培養(yǎng)基的基本步驟是計(jì)算—稱(chēng)量—溶化—__________—倒平板。

（2）若培養(yǎng)得到的菌落數(shù)目偏多，難以統(tǒng)計(jì)，應(yīng)在第3步增加___________步驟。

（3）某同學(xué)在統(tǒng)計(jì)某一實(shí)驗(yàn)組的3個(gè)平板菌落時(shí)，發(fā)現(xiàn)一個(gè)平板所得數(shù)據(jù)和另外兩個(gè)偏差較大，在做原始記錄時(shí)對(duì)該數(shù)據(jù)應(yīng)___________（選填下列選項(xiàng)前的字母）。

A．舍棄 B．修改 C．如實(shí)填寫(xiě)

為了檢驗(yàn)該組相關(guān)數(shù)據(jù)的可靠性，還應(yīng)_________________________。

（4）正是因?yàn)槿耸稚嫌泻芏嗉?xì)菌，因此微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過(guò)程中，通常用75%的酒精對(duì)手進(jìn)行消毒，而不用95%的酒精，其原因是___________________________。

Answer 1

【答案】牛肉膏、蛋白胨 瓊脂 滅菌 梯度稀釋 C 重復(fù)實(shí)驗(yàn) 酒精能使蛋白質(zhì)變性，但95%酒精濃度過(guò)高，會(huì)使細(xì)菌周?chē)�形成一層由凝固蛋白質(zhì)組成的保護(hù)膜，使酒精分子不能進(jìn)入細(xì)菌，達(dá)不到殺死細(xì)菌的作用

【解析】

統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：

（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法

①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。

（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）

①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活

②操作

a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。

b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。

（1）牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白質(zhì)的水解產(chǎn)物，即可以作為氮源，也可以作為碳源。平板為固體培養(yǎng)基，故需要加入瓊脂，即培養(yǎng)基的成分X為瓊脂。配置好培養(yǎng)基后，需將培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌，再倒平板，即配制培養(yǎng)基的基本步驟是計(jì)算—稱(chēng)量—溶化—滅菌—倒平板

（2）若培養(yǎng)得到的菌落數(shù)目偏多，難以統(tǒng)計(jì)，應(yīng)在第3步增加梯度稀釋步驟。

（3）發(fā)現(xiàn)一個(gè)平板所得數(shù)據(jù)和另外兩個(gè)偏差較大，在做原始記錄時(shí)也應(yīng)對(duì)該數(shù)據(jù)如實(shí)填寫(xiě)，C正確，故選C。為了保證實(shí)驗(yàn)可靠，需要重復(fù)實(shí)驗(yàn)（或設(shè)置多個(gè)平行實(shí)驗(yàn)）。

（4）通常用75%的酒精對(duì)手進(jìn)行消毒，而不用95%的酒精，其原因是酒精能使蛋白質(zhì)變性，但95%酒精濃度過(guò)高，會(huì)使細(xì)菌周?chē)�形成一層由凝固蛋白質(zhì)組成的保護(hù)膜，使酒精分子不能進(jìn)入細(xì)菌，達(dá)不到殺死細(xì)菌的作用。