Question

DNA和蛋白質(zhì)是兩種重要的生物大分子物質(zhì)，它們在生物體的生命活動中發(fā)揮著重要的作用．請根據(jù)所學(xué)知識回答下列有關(guān)問題：
（1）關(guān)于DNA粗提�。�
①DNA的粗提取過程中，需要去除DNA濾液中的雜質(zhì)．可選擇

 

溶液使DNA充分溶解，使雜質(zhì)沉淀．
②將以上處理過后的濾液過濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的

 

溶液，靜置2-3分鐘，溶液中就會出現(xiàn)

 

，這就是粗提取的DNA．鑒定DNA時，可用

 

試劑，需用沸水浴加熱5分鐘，觀察溶液是否會變?yōu)樗{色．
③若提取到的DNA含量過低，還可采用PCR技術(shù)進行擴增，PCR技術(shù)中用到的一種重要的酶是

 

．
（2）紅細胞含有大量血紅蛋白，常用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行提取和分離血紅蛋白．
①血紅蛋白的提取和分離一般可分四步：樣品處理、

 

、

 

和純度鑒定．
②實驗前取新鮮的血液．取血后一般要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，加入檸檬酸鈉的目的是

 

．
③通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，該方法的原理是相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)擴散進入凝膠內(nèi)部的通道，通過凝膠柱的路程

 

，移動速度

 

；相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外移動，路程和移動速度剛好相反，相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因而得以分離．最后經(jīng)

 

電泳進行純度鑒定．

Answer 1

考點：DNA的粗提取和鑒定,蛋白質(zhì)的提取和分離

專題：

分析：1、DNA的粗提取與鑒定的實驗原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達到分離的目的；①DNA不容易酒精溶液，細胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進一步分離；③DNA對于酶、高溫和洗滌劑的耐受性，蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是不能水解DNA，蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度，DNA能耐受較高溫度洗滌劑能瓦解細胞膜，但是對DNA沒有影響；④在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍色．
2、血紅蛋白的提取和分離一般的一般步驟是樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定，凝膠色譜法純化蛋白質(zhì)的原理是相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠柱時移動的速度不同，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外移動，路程短，移動速度快，先被洗脫出來，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)擴散進入凝膠內(nèi)部的通道，通過凝膠柱的路程長，移動速度慢，洗脫的次序靠后．

解答： 解：（1）①由于DNA在不同氯化鈉溶液中的溶解度不同，因此可以選擇適當(dāng)濃度的氯化鈉溶液使DNA充分溶解，使雜質(zhì)沉淀或析出DNA使雜質(zhì)溶解．
②將含有DNA的溶液，加入與濾液體積相等的、冷卻的95%酒精后，靜置一段時間，出現(xiàn)的白色絲狀物為DNA分子，鑒定DNA分子的方法是用二苯胺試劑，水浴加熱的條件下觀察顏色變化，如果呈現(xiàn)藍色說明白色絲狀物是DNA分子．
③若提取到的DNA含量過低，還可采用PCR技術(shù)進行擴增，PCR技術(shù)需要用到耐高溫的DNA聚合酶，如TapDNA聚合酶．
（2）①血紅蛋白的提取和分離的步驟是：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定．
②為了防止血液凝固，取血后一般要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉．
③凝膠色譜法純化蛋白質(zhì)的原理是相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠柱時移動的速度不同，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外移動，路程短，移動速度快，先被洗脫出來，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)擴散進入凝膠內(nèi)部的通道，通過凝膠柱的路程長，移動速度慢，洗脫的次序靠后；血紅蛋白的鑒定方法常用
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定．
故答案為：
（1）①適當(dāng)濃度的氯化鈉
②酒精    白色絲狀物    二苯胺
③TapDNA聚合酶
（2）①粗分離   純化  
②防止血液凝固
③較長   較慢   SDS-聚丙烯酰胺凝膠

點評：對于DNA粗提取和鑒定及血紅蛋白的提取和分離實驗的實驗原理和具體操作步驟的掌握是本題考查的重點．