Question

2．研究人員用四倍體馬鈴薯（4n=48）和抗青枯病的野生型二倍體馬鈴薯（2n=24）進行體細胞雜交，培育抗青枯病的馬鈴薯．
（1）研究人員用四倍體馬鈴薯的葉片探究原生質體制備條件，結果如表所示：

組別	酶的種類	酶的濃度 （%）	原生質體產量 （×106個/g）	鏡檢結果
1	纖維素酶	1.0	0.4	未解離的細胞團多
	果膠酶	0.5
2	纖維素酶	1.0	0.08	有許多碎片
	果膠酶	1.0
3	纖維素酶	0.5	1.5	未完全解離
	果膠酶	0.5
4	纖維素酶	0.5	3.4	解離較好，細胞破碎嚴重
	果膠酶	1.0
5	纖維素酶	0.4	18.8	解離充分，碎片少
	果膠酶	0.7

①據表分析，制備原生質體的最佳組合是第5組，葉片解離程度主要取決于果膠酶的濃度．
②制備的原生質體應置于濃度略高于馬鈴薯葉片細胞液濃度的溶液中進行培養(yǎng)，以保持原生質體的正常形態(tài)．
（2）為了便于在顯微鏡下對雜種細胞進行鏡檢篩選，將用四倍體馬鈴薯葉片制備的原生質體與用野生型二倍體馬鈴薯的幼根（填“葉片”或“幼根”）為材料制備的原生質體進行融合．把兩種原生質體置于加入PEG（或“聚乙二醇”）的溶液中促融．
（3）為進一步從染色體水平上檢測雜種植株，科學家選取雜種植株根尖進行解離、漂洗后用堿性染料染色并制片，顯微鏡下對有絲分裂中期的細胞進行染色體計數．
（4）為達到育種目標，還需要對雜種植株進行青枯病抗性檢測以篩選得到抗性馬鈴薯新種．

Answer 1

分析 1、分析圖表：第1組和第2組、第3組和第4組的纖維素酶濃度相同，果膠酶濃度不同，實驗結果原生質的產量不同，故葉片解離程度主要取決于果膠酶的濃度；
2、制備的原生質體應置于濃度等于細胞液濃度的溶液中進行培養(yǎng)，以保持原生質體的正常形態(tài)；
3、幼嫩的組織分生能力強，易組織培養(yǎng)成功．
4、用植株根尖制作有絲分裂裝片的步驟為：解離→漂洗→染色→制片．

解答 解：（1）①據表分析，制備原生質體的最佳組合是第5組，根據第1組和第2組、第3組和第4組的纖維素酶濃度相同，果膠酶濃度不同，實驗結果原生質的產量不同，可知：葉片解離程度主要取決于果膠酶的濃度．
②制備的原生質體應置于濃度或略高于馬鈴薯葉片細胞液濃度的溶液中進行培養(yǎng)，以保持原生質體的正常形態(tài)．
（2）可根據染色體的形態(tài)和數目對雜種細胞進行鏡檢篩選，將用四倍體馬鈴薯葉片制備的原生質體與用野生型二倍體馬鈴薯的幼根為材料制備的原生質體進行融合．（幼根有分裂增殖能力，能觀察到染色體）把兩種原生質體置于加入PEG（或“聚乙二醇”）的溶液中促融．
（3）為進一步從染色體水平上檢測雜種植株，科學家選取雜種植株根尖進行解離、漂洗后用堿性染料染色并制片，顯微鏡下對有絲分裂中期的細胞進行染色體計數（因為中期細胞中染色體形態(tài)穩(wěn)定、數目清晰，是觀察染色體形態(tài)和數目的最佳時期）．
（4）為達到育種目標，還需要對雜種植株進行青枯病抗性檢測以篩選得到抗性馬鈴薯新種．
故答案為：
（1）①5     果膠酶     ②略高于
（2）幼根      PEG（或“聚乙二醇”）
（3）解離、漂洗    有絲分裂中
（4）青枯病

點評 本題考查了根據圖表獲取有效信息，推測實驗變量的能力、原生質體的制備、雜種細胞的鑒定方法、雜種植株的篩選等關知識，要求考生具有一定的審題和推理能力，難度中等．