Question

通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法可以研究某種化學(xué)物質(zhì)是否能夠使染色體畸變，請(qǐng)你完成下列實(shí)驗(yàn)并回答有關(guān)問題．
實(shí)驗(yàn)原理：有毒物質(zhì)能誘導(dǎo)染色體畸變，根據(jù)發(fā)生染色體畸變細(xì)胞的數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)），可判斷該化學(xué)物質(zhì)的致畸性的強(qiáng)弱．
材料、藥品、用具：
活的小白鼠胚胎某種化學(xué)物質(zhì)、某種酶液、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、動(dòng)物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、生理鹽水、滅菌設(shè)備、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、培養(yǎng)瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡．等等．
實(shí)驗(yàn)步驟：
（1）制備細(xì)胞懸浮液
把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入

 

酶液處理，使胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，再加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液．
（2）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)
①取A、B二個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶，

 

．
②向A培養(yǎng)瓶中加入適量的該化學(xué)物質(zhì)并將培養(yǎng)瓶搖勻；向B瓶中加入

 

．在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，由于動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長(zhǎng)具有

 

現(xiàn)象，所以細(xì)胞停止分裂增殖時(shí)，培養(yǎng)瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是

 

．
（3）制作臨時(shí)裝片
①細(xì)胞增殖到大約第8代左右時(shí)，同時(shí)從恒溫箱中取出二個(gè)培養(yǎng)瓶，再次將瓶?jī)?nèi)動(dòng)物細(xì)胞處理成細(xì)胞懸浮液，加入動(dòng)物細(xì)胞固定液以便迅速殺死并固定細(xì)胞．
②靜置一段時(shí)間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號(hào)的載玻片的中央，

 

3～5min后，蓋上蓋玻片．
（4）鏡檢和統(tǒng)計(jì)
把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于

 

期的細(xì)胞，并與B組觀察結(jié)果作對(duì)比．
預(yù)期結(jié)果及相應(yīng)的結(jié)論（與B組相比較）
如果

 

，則說明這種化學(xué)物質(zhì)致畸性很強(qiáng)；
如果

 

，則說明這種化學(xué)物質(zhì)致畸性較弱；
如果

 

，則說明這種化學(xué)物質(zhì)沒有致畸性．

Answer 1

考點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程

專題：

分析：實(shí)驗(yàn)組：經(jīng)過處理的組是實(shí)驗(yàn)組．對(duì)照組：未經(jīng)過處理的組是對(duì)照組．變量：實(shí)驗(yàn)過程中可以變化的因素稱為變量．自變量：想研究且可人為改變的變量稱為自變量．因變量：隨著自變量的變化而變化的變量稱為因變量．無關(guān)變量：在實(shí)驗(yàn)中，除了自變量外，實(shí)驗(yàn)過程中存在一些可變因素，能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，這些變量稱為無關(guān)變量．

解答： 解：（1）把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，再加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液．
（2）①取A、B二個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶，（消毒滅菌，）加入等量的細(xì)胞懸浮液．
②向A培養(yǎng)瓶中加入適量的該化學(xué)物質(zhì)并將培養(yǎng)瓶搖勻；向B瓶中加入等量生理鹽水．在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，由于動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長(zhǎng)具有接觸抑制現(xiàn)象，所以細(xì)胞停止分裂增殖時(shí)，培養(yǎng)瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是單層（或一層）．
（3）②靜置一段時(shí)間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號(hào)的載玻片的中央，用適宜濃度龍膽紫溶液染色3～5min后，蓋上蓋玻片．
（4）把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于細(xì)胞有絲分裂中期的細(xì)胞，并與B組觀察結(jié)果作對(duì)比．
預(yù)期結(jié)果及相應(yīng)的結(jié)論：
如果染色體畸變的細(xì)胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)）很多，則說明這種化學(xué)物質(zhì)致畸性很強(qiáng)；
如果染色體畸變的細(xì)胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)）較少，則說明這種化學(xué)物質(zhì)致畸性較弱；
如果染色體畸變的細(xì)胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)）幾乎沒有，則說明這種化學(xué)物質(zhì)沒有致畸性．
故答案為：
（1）胰蛋白
（2）①（消毒滅菌，）加入等量的細(xì)胞懸浮液
    ②等量生理鹽水 接觸抑制      單層（或一層）
（3）②用適宜濃度龍膽紫溶液染色
（4）細(xì)胞有絲分裂中
預(yù)期結(jié)果及相應(yīng)的結(jié)論：
染色體畸變的細(xì)胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)）很多
染色體畸變的細(xì)胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)）較少
染色體畸變的細(xì)胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)）幾乎沒有

點(diǎn)評(píng)：本題考查探究實(shí)驗(yàn)，意在考查提升學(xué)生理解動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和分析實(shí)驗(yàn)的能力．實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要注意單一變量原則和對(duì)照原則．要注意無關(guān)變量應(yīng)該相同且適宜．