Question

【題目】依據(jù)復制與宿主菌相關程度不同，細菌中的質粒分松散型質粒和嚴謹型質粒。當宿主菌蛋白質合成停止時， 嚴謹型質粒 DNA 復制隨之停止，松散型質粒 DNA 復制仍可進行。

（1）通常選用松散型質粒作為基因工程載體，原因是_____。

（2）細菌體內(nèi)限制酶不剪切該細菌本身的 DNA，這是在長期的進化中形成了一套完善的_____，但能 對外源 DNA 進行降解，有利于_____。事實上，上述細菌仍允許部分異源 DNA 進入體內(nèi)，其意義是_____。

（3）轉化是指_____。在培育轉基因熒光海馬時發(fā)現(xiàn)“轉化”不成功，原因可能是_____。

（4）人們已經(jīng)認識到，從微生物到人類都共用一套遺傳密碼，這一事實為研究基因工程提供了什么啟示：_____。

Answer 1

【答案】目的基因容易復制。 防御機制 防止外源DNA（遺傳物質）的入侵 有利于生物變異和進化 目的基因進入受體細胞并維持穩(wěn)定核表達的過程 目的基因未導入受體細胞；目的基因未轉錄；目的基因未翻譯（或未表達） 從蛋白質的氨基酸組成，推測和合成目的基因；某生物的基因可以轉移到其他生物并表達出相同的蛋白質

【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）當宿主菌蛋白質合成停止時，嚴謹型質粒 DNA 復制隨之停止，松散型質粒 DNA 復制仍可進行，通常選用松散型質粒作為基因工程載體，原因是目的基因容易復制。

（2）細菌體內(nèi)限制酶不剪切該細菌本身的 DNA，這是在長期的進化中形成了一套完善的防御機制，保護自身DNA不被破壞，能對外源DNA進行降解，有利于防止外源DNA（遺傳物質）的入侵。事實上，上述細菌仍允許部分異源 DNA 進入體內(nèi)，其意義是有利于生物變異和進化。

（3）轉化是指目的基因進入受體細胞并維持穩(wěn)定核表達的過程。在培育轉基因熒光海馬時發(fā)現(xiàn)“轉化”不成功，原因可能是目的基因未導入受體細胞；目的基因未轉錄；目的基因未翻譯（或未表達）。

（4）從微生物到人類都共用一套遺傳密碼，這一事實為研究基因工程提供的啟示：可以從蛋白質的氨基酸組成，推測和合成目的基因；某生物的基因可以轉移到其他生物并表達出相同的蛋白質。