Question

20．乳酸菌是泡菜制作中起主要作用的菌群，某科研小組從泡菜液中分離、篩選純種乳酸菌，對其功能進行相關(guān)研究，為改進傳統(tǒng)泡菜生產(chǎn)工藝提供技術(shù)參考．
（1）乳酸菌菌種的分離與純化：取泡菜發(fā)酵汁進行梯度稀釋（或系列梯度）操作，得到10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶倍的稀釋液．選擇合適的稀釋度樣液加入10mL乳酸菌分離培養(yǎng)基（MRS培養(yǎng)基），凝固后再注入5mL水瓊脂培養(yǎng)基，造成厭氧（需氧/厭氧）環(huán)境，37℃培養(yǎng)2～3天，根據(jù)菌落的形狀、大小、隆起程度等特征，進行反復(fù)分離、純化至純菌種．整個操作過程需在無菌條件下進行．
（2）產(chǎn)強酸菌株的篩選：利用產(chǎn)酸菌在含CaCO₃的培養(yǎng)基上產(chǎn)生溶解圈的原理，將上述菌種接種到含CaCO₃的MRS培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)，挑選溶解圈較大的菌落，進一步純化．
（3）產(chǎn)強酸菌株的功能研究，結(jié)果如圖：人工接種乳酸菌有利于抑制（促進/抑制）亞硝酸鹽的生成．泡菜制作過程中，影響亞硝酸鹽含量的因素還有時間、溫度和食鹽用量等．

Answer 1

分析 分析題圖：人工接種和自然發(fā)酵相比，人工接種產(chǎn)生的亞硝酸鹽少，說明人工接種乳酸菌有利于抑制亞硝酸鹽的生成．

解答 解：（1）乳酸菌菌種的分離與純化：取泡菜發(fā)酵汁進行梯度稀釋（或系列梯度）操作，得到10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶倍的稀釋液．乳酸菌屬于厭氧菌，所以培養(yǎng)乳酸菌時需要厭氧環(huán)境；分離、純合菌種的操作過程需要在無菌條件下進行．
（2）產(chǎn)酸菌能在含CaCO₃的培養(yǎng)基上產(chǎn)生溶解圈，且產(chǎn)生的溶解圈越大，說明其產(chǎn)酸能力越強，因此要挑選溶解圈較大的菌落進行進一步純化．
（3）根據(jù)曲線圖中結(jié)果可知，人工接種乳酸菌有利于抑制亞硝酸鹽的生成．泡菜制作過程中，影響亞硝酸鹽含量的因素還有時間、溫度和食鹽用量等．
故答案為：
（1）梯度稀釋（或系列梯度）   厭氧       菌落    無菌
（2）溶解圈較大
（3）抑制    溫度    食鹽用量

點評 本題結(jié)合曲線圖，考查泡菜的制作、微生物的分離和培養(yǎng)等知識，要求考生識記參與泡菜制作的微生物及其代謝類型；識記微生物分離和培養(yǎng)的過程，采用的接種方法等，能結(jié)合所學的知識準確答題．