Question

14．如圖是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡化流程．請分析回答：

（1）過程①使用的（同一種）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）酶能使特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵（化學(xué)鍵）斷開．運載體的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可通過堿基互補原則     而結(jié)合． 過程②需要用到DNA連接酶酶，
（2圖中A的名稱是重組載體（重組質(zhì)粒），它重組成功的物質(zhì)基礎(chǔ)是干擾素基因的DNA與細(xì)菌質(zhì)粒DNA的結(jié)構(gòu)組成相同．
（3）A上應(yīng)有RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動干擾素基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱為啟動子．為直接檢測干擾素基因是否轉(zhuǎn)錄，可從細(xì)胞中提取RNA與用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作探針進(jìn)行分子雜交，．
（4）利用PCR擴增儀大量擴增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要一段是已知的，以便根據(jù)這一序列合成DNA聚合酶（Taq酶），除了該物質(zhì)和目的基因外，擴增儀中還需加入四種脫氧核苷酸和引物酶，并適時調(diào)整溫度，才能使目的基因數(shù)量成指數(shù)式增長．
（5）在該工程中所用的基因“剪刀”能識別的序列和切點是-G′GATCC-．請畫出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過程圖

Answer 1

分析 基因工程的基本操作程序
第一步：目的基因的獲取
第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建
第三步：將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞
第四步：目的基因的檢測和表達(dá)

解答 解：（1）切割目的基因和質(zhì)粒需用同一種限制性核酸內(nèi)切酶．限制酶破壞脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，目的基因與質(zhì)粒的黏性末端之間通過堿基互補配對連接起來，通過DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒．
（2）由于干擾素基因的DNA與細(xì)菌質(zhì)粒DNA結(jié)構(gòu)組成相同，所以可構(gòu)建重組質(zhì)粒．
（3）驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄的結(jié)構(gòu)是啟動子．檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄，可從細(xì)胞中提取RNA與用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作探針進(jìn)行分子雜交．
（4）PCR的條件需有引物和耐高溫的DNA聚合酶，即Taq酶．
（5）黏性末端是兩條鏈，如圖：
-G′GATCC--G GATCC-
-C CTAGG--CCTAG G-
 故答案為：
（1）（同一種）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）  磷酸二酯鍵   堿基互補原則  DNA連接酶
（2）重組載體（重組質(zhì)粒） 干擾素基因的DNA與細(xì)菌質(zhì)粒DNA
（3）啟動子   RNA   目的基因
（4）引物    DNA聚合酶（Taq酶）
（5）-G′GATCC--G GATCC-
-C CTAGG--CCTAG G-

點評 本題結(jié)合利用利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡化流程，考查基因工程的技術(shù)及原理及應(yīng)用，要求考生識記基因工程的原理及技術(shù)，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，能運用所學(xué)的知識結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各題．