Question

16．某市水源中發(fā)現(xiàn)一種有害的、難于降解的有機化合物甲．研究人員使用由化合物甲、葡萄糖、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的初選培養(yǎng)基，再經(jīng)過一系列后續(xù)步驟，成功地篩選到能高效降解化合物甲的細菌（M菌）．實驗的主要步驟如圖所示．請分析回答問題：
（1）下列實驗材料或用具中，需要滅菌的是②③④（填序號），需要消毒的是⑤．
①配制培養(yǎng)基用的玻璃棒、稱量紙、燒杯②培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基③培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)皿④接種用的試管、錐形瓶和吸管⑤實驗操作者的雙手
（2）初選培養(yǎng)基中加入化合物甲的目的是篩選篩選目的菌（填序號）；該培養(yǎng)基的氮源是化合物甲，凝固劑是瓊脂．M菌能夠高效降解化合物甲的原因是M菌能夠分泌降解該化合物甲的酶．
（3）實驗需要振蕩培養(yǎng)，結(jié)合題目其他信息，推測M菌的代謝類型是異養(yǎng)需氧型．
（4）候選菌接種到培養(yǎng)液培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物甲含量最少的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，使M菌的數(shù)量增加．如果要對培養(yǎng)液中的活菌進行計數(shù)，一般采用稀釋涂布平板法；這種方法的統(tǒng)計結(jié)果往往比活菌的實際數(shù)目少．（填“多”或“少”）
（5）使用固體培養(yǎng)基時，為獲得單菌落，常采用法平板劃線法或稀釋涂布平板法法．接種后應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置，原因是既可以使培養(yǎng)基中的水分更好得揮發(fā)，又可以避免培養(yǎng)皿蓋上的水滴落到培養(yǎng)基上造成污染．

Answer 1

分析 本題考查的知識點有選擇培養(yǎng)基、微生物的代謝類型、技術(shù)方法、微生物的分離方法等．主要的知識點的分析：
（1）微生物的營養(yǎng)物質(zhì)：碳源、氮源、無機鹽、水、生長因子．
（2）選擇培養(yǎng)基：原理是不同微生物在代謝過程中所需要的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同．結(jié)合微生物的營養(yǎng)物質(zhì)、題目提供的信息“篩選到能高效降解化合物甲的細菌”、“研究人員用化合物甲、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基”，可以判斷出“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的化合物甲．
（3）微生物的分離方法有有平板劃線法和稀釋涂布平板法．

解答 解：（1）在培養(yǎng)基的制作過程中需要對操作者的雙手進行消毒，對培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基、培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)皿和接種用的試管、錐形瓶和吸管進行滅菌．
（2）培養(yǎng)基中加入化合物甲后，配成的培養(yǎng)基能成功地篩選到能高效降解化合物A甲的細菌（目的菌），所以這一步的目的是篩選目的菌，培養(yǎng)基中化合物甲是氮源，目的菌體內(nèi)可能含有能夠降解該化合物甲的酶，故M菌能夠高效降解化合物甲．
（3）從題目中的培養(yǎng)基的組成中有有機物和振蕩看出是為了供應(yīng)充足的氧氣，可推測“目的菌”的代謝類型是異養(yǎng)需氧型．
（4）如果“目的菌”能利用化合物甲，則應(yīng)該選擇培養(yǎng)瓶中化合物甲的量最少的作為菌種進行繼續(xù)培養(yǎng)．活菌計數(shù)一般采用稀釋涂布平板法進行計數(shù)．這種方法的統(tǒng)計結(jié)果往往比活菌的實際數(shù)目少．
（5）獲得單菌落的接種方法主要是稀釋涂布平板法和平板計數(shù)法．接種后應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置，原因是既可以使培養(yǎng)基中的水分更好得揮發(fā)，又可以避免培養(yǎng)皿蓋上的水滴落到培養(yǎng)基上造成污染．
故答案為：
（1）②③④⑤
（2）篩選目的菌   化合物甲   瓊脂    M菌能夠分泌降解該化合物甲的酶
（3）異養(yǎng)需氧型
（4）最少   稀釋涂布平板   少
（5）平板劃線法   稀釋涂布平板法   既可以使培養(yǎng)基中的水分更好得揮發(fā)，又可以避免培養(yǎng)皿蓋上的水滴落到培養(yǎng)基上造成污染

點評 本題的知識點是微生物的選擇培養(yǎng)、培養(yǎng)基的成分和制備，接種方法和滅菌方法等，主要考查運用所學(xué)知識解決實際問題的能力．