Question

7．下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述，不正確的是（　�。�

• A． 在土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)采用平板劃線法
• B． 在DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，向溶解DNA的燒杯中加蒸餾水的目的是漂洗DNA
• C． 腐乳制作過(guò)程中，料酒的用量過(guò)多，后期成熟時(shí)間將延長(zhǎng)
• D． 提取植物細(xì)胞DNA時(shí)需在研缽中加入洗滌劑和食鹽

Answer 1

分析 1、DNA粗提取和鑒定的原理：
（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性．
（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色．
2、DNA粗提取和鑒定的過(guò)程：
（1）實(shí)驗(yàn)材料的選�。悍彩呛�有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對(duì)較高的生物組織，成功的可能性更大．
（2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液：
動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過(guò)濾后收集濾液即可．如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過(guò)濾后收集研磨液．
（3）去除濾液中的雜質(zhì)：
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同．
方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開(kāi)；方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離．
（4）DNA的析出與鑒定：
①將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．
②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)．
3、微生物的計(jì)數(shù)需要使用稀釋涂布平板法．腐乳的制作過(guò)程中，含量一般控制在12%左右．加酒可以抑制微生物的生長(zhǎng)，同時(shí)能使腐乳具有獨(dú)特的香味．DNA和蛋白質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同．

解答 解：A、在土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)采用稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；
B、向溶解DNA中的燒杯中加蒸餾水的目的是稀釋氯化鈉溶液的濃度，使DNA析出，B錯(cuò)誤；
C、腐乳制作過(guò)程中，料酒的用量過(guò)多，后期成熟時(shí)間延長(zhǎng)，C正確；
D、提取植物細(xì)胞DNA時(shí)需在研缽中加入洗滌劑和氯化鈉等試劑，其中洗滌劑可能瓦解細(xì)胞膜，氯化鈉可溶解DNA，D正確．
故選：AB．

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查微生物培養(yǎng)、DNA粗提取和鑒定的相關(guān)知識(shí)，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的理解與運(yùn)用．