Question

19．如圖為基因工程中利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，培育出新性狀植株的過程，請據(jù)圖分析回答：

（1）將攜帶外源基因的DNA導入植物細胞中所用到的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶．
（2）農(nóng)桿菌在自然狀態(tài)下，能感染雙子葉植物和裸子植物，因為這些植物受到損傷時，傷口會分泌大量的酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時，作為基因工程中運載體的是Ti質(zhì)粒．
（3）目的基因?qū)�入植物細胞后，能夠在受體細胞中維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化．檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，常用的方法是分子雜交技術．
（4）導入目的基因的植物細胞一般需要通過植物組織培養(yǎng)的方法，才能培育成表現(xiàn)新性狀的植株．利用基因工程進行育種，可以培育出具有新性狀的植株，這種育種方式的優(yōu)點是：①能打破生物種屬的界限；②在分子水平上定向改變生物的遺傳特性．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）將攜帶外源基因的DNA導入植物細胞之前，首先要構(gòu)建基因表達載體，該步驟需要限制酶和DNA連接酶．
（2）農(nóng)桿菌在自然狀態(tài)下，能感染雙子葉植物和裸子植物，因為這些植物受到損傷時，傷口會分泌大量的酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時，作為基因工程中運載體的是Ti質(zhì)粒，Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上．
（3）目的基因?qū)�入植物細胞后，能夠在受體細胞中維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化．檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，常用分子雜交技術．
（4）將轉(zhuǎn)基因細胞培育成轉(zhuǎn)基因植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術；利用基因工程進行育種，可以培育出具有新性狀的植株，這種育種方式的優(yōu)點是：①能打破生物種屬的界限；②在分子水平上定向改變生物的遺傳特性．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶      
（2）雙子葉   酚類化合物  Ti質(zhì)粒
（3）轉(zhuǎn)化     分子雜交技術
（4）植物組織培養(yǎng)
①能打破生物種屬的界限
②在分子水平上定向改變生物的遺傳特性

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合圖中信息答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．