Question

5．中國科學(xué)家成功將人肝再生增強(qiáng)因子（ hALR）的基因?qū)�入羊的乳腺上皮�?xì)胞中，再利用核移植技術(shù)培育出了轉(zhuǎn)基因克隆羊，其乳汁含有hALR．請回答下列問題：
（1）從人的肝細(xì)胞中獲取所有mRNA，并以此為模板反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生多種cDNA/互補(bǔ)DNA片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，該受體菌群體叫做人的cDNA（部分DNA）文庫，從該文庫中獲得hALR基因，這樣獲得的基因與人的肝細(xì)胞中的hALR基因相比有（有/沒有）區(qū)別．
（2）得到hALR基因后，若要較快地得到大量的hALR基因，一般采用PCR技術(shù)擴(kuò)增．?dāng)U增過程包括：目的基因解鏈為單鏈、引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合、在Taq/熱穩(wěn)定DNA聚合/DNA聚合酶作用下延伸，如此重復(fù)循環(huán)．如圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向，請用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出另一條引物的位置及擴(kuò)增方向．

（3）目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因．
（4）人的hALR基因能夠在羊乳腺細(xì)胞表達(dá)出相同的hALR，說明所有生物共用一套密碼子．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、cDNA文庫和基因文庫的比較表：

文庫類型	cDNA	基因組文庫
文庫大小	小	大
基因中啟動(dòng)子	無	有
基因中內(nèi)含子	無	有
基因多少	某種生物的部分基因	某種生物的全部基因
物種間的基因交流	可以	部分基因可以

解答 解：（1）以mRNA為模板，通過逆轉(zhuǎn)錄方法產(chǎn)生多種cDNA片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，該受體菌群體叫做cDNA（部分DNA）文庫；從部分基因文庫中獲取的DNA沒有啟動(dòng)子、內(nèi)含子和終止子等，因此這樣獲得的基因與人的肝細(xì)胞中的hALR基因相比有區(qū)別．
（2）PCR技術(shù)擴(kuò)增過程包括：目的基因解鏈為單鏈、引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合、在熱穩(wěn)定DNA聚合酶作用下延伸，如此重復(fù)循環(huán)．由于DNA分子的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械�，且延伸總是�?'-5'，若圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向，則另一條引物的位置及擴(kuò)增方向．如圖．
（3）目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因．
（4）由于生物共用一套遺傳密碼子，因此人的hALR基因能夠在羊乳腺細(xì)胞表達(dá)出相同的hALR．
故答案為：
（1）cDNA/互補(bǔ)DNA     cDNA（部分DNA）    有
（2）引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合    Taq/熱穩(wěn)定DNA聚合/DNA聚合      

（3）插入了目的基因
（4）共用一套密碼子

點(diǎn)評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、概念、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)．