Question

6．圖是利用基因工程和植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得新植株的過(guò)程，請(qǐng)回答：

（1）農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒分布在細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，圖中A表示Ti質(zhì)粒的T-DNA，切割A(yù)需要使用相應(yīng)的限制酶．
（2）C→D過(guò)程，需要使用Ca²⁺處理，使D處于一種能吸收周?chē)�環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱(chēng)為感受態(tài)細(xì)胞．
（3）在植物中，一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)有關(guān)激素的誘導(dǎo)，脫分化為具有分生能力的薄壁細(xì)胞，進(jìn)而形成植物的愈傷組織．愈傷組織在一定的培養(yǎng)條件下，又可以再分化出幼根和芽，形成完成的小植株．在此培養(yǎng)過(guò)程中，要求無(wú)菌操作的原因是：一方面雜菌的生長(zhǎng)會(huì)與目標(biāo)培養(yǎng)物競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)，從而使其失去營(yíng)養(yǎng)；另一方面雜菌會(huì)大量產(chǎn)生對(duì)目標(biāo)培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導(dǎo)致目標(biāo)培養(yǎng)物不能正常生長(zhǎng)發(fā)育甚至死亡．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞 ④目的基因的檢測(cè)與鑒定．
2、基因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體．需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過(guò)DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體．
3、將目的基因?qū)�入原核�?xì)胞，常用CaCl₂處理以增加細(xì)胞壁的通透性，變成感受態(tài)細(xì)胞，能吸收周?chē)�的DNA分子．
4、植物組織培養(yǎng)的過(guò)程：離體的植物組織，器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株（新植體）．

解答 解：（1）農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒是擬核外環(huán)狀DNA分子，分布在細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，圖中A表示Ti質(zhì)粒的T-DNA，切割A(yù)需要使用限制性?xún)?nèi)切酶切割．
（2）作為受體細(xì)胞，常用Ca²⁺處理法，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使其處于一種能吸收周?chē)�環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)．
（3）在植物中，一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)有關(guān)激素的誘導(dǎo)，脫分化為具有分生能力的薄壁細(xì)胞，進(jìn)而形成植物的愈傷組織．愈傷組織在一定的培養(yǎng)條件下，又可以再分化出幼根和芽，形成完成的小植株．在此培養(yǎng)過(guò)程中，要求無(wú)菌操作的原因是：一方面雜菌的生長(zhǎng)會(huì)與目標(biāo)培養(yǎng)物競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)，從而使其失去營(yíng)養(yǎng)；另一方面雜菌會(huì)大量產(chǎn)生對(duì)目標(biāo)培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導(dǎo)致目標(biāo)培養(yǎng)物不能正常生長(zhǎng)發(fā)育甚至死亡．
故答案為：
（1）細(xì)胞質(zhì)    相應(yīng)的限制酶
（2）Ca²⁺       感受態(tài)細(xì)胞
（3）激素       脫分化      分生能力       再分化        競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)，從而使其失去營(yíng)養(yǎng)         有害的物質(zhì)，導(dǎo)致目標(biāo)培養(yǎng)物不能正常生長(zhǎng)發(fā)育甚至死亡

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合操作過(guò)程示意圖考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．