Question

4．（一）有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株．回答問(wèn)題．
（1）在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（3）篩選高效菌株時(shí)，可比較單菌落周?chē)�分解圈（透明圈），分解圈越大說(shuō)明該菌株的降解能力強(qiáng)．
（4）細(xì)菌種群進(jìn)化過(guò)程中，其主要作用的變異來(lái)源是基因突變．
（二）富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中的最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一．主要是利用不同微生物生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同，制定環(huán)境條件，使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長(zhǎng)，從而使其數(shù)量大大增加．如圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類(lèi)化合物--對(duì)羥基苯甲酸的微生物的實(shí)驗(yàn)過(guò)程．請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題．
（1）①→③重復(fù)培養(yǎng)的目的是擴(kuò)大培養(yǎng)（使分解對(duì)羥基苯甲酸微生物的比例增高）．
（2）⑤的菌落中大部分是降解對(duì)羥基苯甲酸微生物．設(shè)置⑥的目對(duì)照作用．
（3）⑤→⑥采用單細(xì)胞挑取法，將所選菌種接種到⑥的培養(yǎng)基中，在此操作過(guò)程中如何防止雜菌污染（至少寫(xiě)出兩點(diǎn)）．接種過(guò)程在火焰旁邊進(jìn)行，接種前灼燒接種環(huán)，打開(kāi)試管后試管口在酒精燈上灼燒，培養(yǎng)皿打開(kāi)時(shí)，在酒精燈旁打開(kāi)一個(gè)縫隙等等．

Answer 1

分析 培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽．培養(yǎng)基的分類(lèi)：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學(xué)成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說(shuō)明有大腸桿菌．

解答 解：（1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無(wú)其它碳源，不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類(lèi)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）分離純化菌種時(shí)，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細(xì)菌細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，以便純化菌種．
（3）降解原油能力越強(qiáng)的菌株，在菌落周?chē)�形成的分解圈（透明圈）越大�?br />（4）細(xì)菌是原核生物，沒(méi)有染色體變異和基因重組，其變異來(lái)源是基因突變．
（二）（1）經(jīng)過(guò)①②③的重復(fù)培養(yǎng)，增大了分解對(duì)羥基苯甲酸的微生物的比例．
（2）培養(yǎng)的微生物主要是能降解對(duì)羥基苯甲酸的微生物，所以⑤的菌落中大部分是降解對(duì)羥基苯甲酸微生物．⑥中沒(méi)有對(duì)羥基苯甲酸，⑦中含有對(duì)羥基苯甲酸，所以⑥是對(duì)照組，對(duì)照的目的是說(shuō)明通過(guò)選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物．
（3）接種過(guò)程在火焰旁邊進(jìn)行，接種前灼燒接種環(huán)，打開(kāi)試管后試管口在酒精燈上灼燒，培養(yǎng)皿打開(kāi)時(shí)，在酒精燈旁打開(kāi)一個(gè)縫隙等等．
故答案為：
（一）（1）原油　選擇　
（2）平板劃線法　稀釋涂布平板法　
（3）分解圈（透明圈）     分解圈越大     強(qiáng)
（4）基因突變
（二）（1）擴(kuò)大培養(yǎng)（使分解對(duì)羥基苯甲酸微生物的比例增高） 
（2）對(duì)羥基苯甲酸  對(duì)照作用
（3）接種過(guò)程在火焰旁邊進(jìn)行，接種前灼燒接種環(huán)，打開(kāi)試管后試管口在酒精燈上灼燒，培養(yǎng)皿打開(kāi)時(shí)，在酒精燈旁打開(kāi)一個(gè)縫隙等等

點(diǎn)評(píng) 本題的知識(shí)點(diǎn)是微生物培養(yǎng)過(guò)程中的無(wú)菌技術(shù)，分離微生物的常用的接種方法和接種工具，主要考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．