Question

7．飼養(yǎng)動(dòng)物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動(dòng)物吸收利用，還影響對其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用．若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等．以下是科研人員從植物根部土壤中分離能產(chǎn)生植酸酶的菌株的過程示意圖．請分析作答．

（1）分離產(chǎn)植酸酶的菌株，需先配制合適的培養(yǎng)基，配制好的培養(yǎng)基要滅菌．對培養(yǎng)基滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌；滅菌后要倒平板，一般需培養(yǎng)基的溫度冷卻到50℃左右，在酒精燈火焰附近操作；從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）接種以前進(jìn)行的一系列稀釋操作，目的是在培養(yǎng)皿表面形成單個(gè)菌落．這種接種方法是稀釋涂布平板法．根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)．如果按題中處理后，統(tǒng)計(jì)的平板上平均有30個(gè)菌落，則1g土壤中大致的活菌數(shù)量是3×10⁷．
（3）由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)生植酸酶．實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示A～E五種菌株中，E是產(chǎn)植酸酶的最理想菌株．

Answer 1

分析 釋平板法在培養(yǎng)基上分離、培養(yǎng)出微生物的單個(gè)菌落，以便于計(jì)數(shù)、移植、分離，從而達(dá)到純培養(yǎng)的目的．選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長．由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶．在微生物實(shí)驗(yàn)操作中，防止雜菌污染時(shí)貫穿實(shí)驗(yàn)整個(gè)過程中．計(jì)算菌種數(shù)時(shí)，關(guān)注稀釋的倍數(shù)．

解答 解：（1）分離產(chǎn)植酸酶的菌株，需先配制合適的培養(yǎng)基，配制好的培養(yǎng)基要滅菌．對培養(yǎng)基滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌；滅菌后要倒平板，一般需培養(yǎng)基的溫度冷卻到50℃左右，在酒精燈火焰附近操作；本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菑闹参锔�部土壤中分離能產(chǎn)生植酸酶的菌株，因此從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）接種以前進(jìn)行的一系列稀釋操作，表明該接種方式為稀釋涂布平板法，目的是在培養(yǎng)皿表面形成單個(gè)菌落．根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)．如果按題中處理后，統(tǒng)計(jì)的平板上平均有30個(gè)菌落，則1g土壤中大致的活菌數(shù)量=30÷0.1×10⁵═3×10⁷．
（3）由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)生植酸酶．分析題圖可知，菌落E周圍的透明圈最大，是產(chǎn)植酸酶的理想菌株．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌  50℃酒精燈火焰  選擇   
（2）單個(gè)菌落   稀釋涂布平板法  菌落數(shù)  3×10⁷
（3）植酸酶  E

點(diǎn)評 本題的知識點(diǎn)是培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分，實(shí)驗(yàn)過程中的無菌技術(shù)，統(tǒng)計(jì)樣品中菌落數(shù)的方法，主要考查學(xué)生對微生物培養(yǎng)知識的掌握和利用微生物培養(yǎng)技術(shù)解決生產(chǎn)、生活中問題的能力．