Question

14．我國(guó)家電研究院的洗衣機(jī)專(zhuān)家指出，洗衣機(jī)內(nèi)部的環(huán)境非常潮濕，洗衣機(jī)使用時(shí)間越長(zhǎng)，內(nèi)部滋生微生物的機(jī)會(huì)就越大．看似干凈的洗衣機(jī)其實(shí)內(nèi)部隱藏著一個(gè)健康的隱形殺手．某生物興趣小組的同學(xué)，利用內(nèi)桶背面的污垢進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)．如圖是某同學(xué)分離和培養(yǎng)洗衣機(jī)中微生物的部分操作步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果示意圖．

（1）圖1所示的是制備固體培養(yǎng)基時(shí)的實(shí)驗(yàn)操作步驟之一，該操作稱(chēng)為倒平板，若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)洗衣機(jī)中滋生的細(xì)菌時(shí)，除考慮各種營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、pH、氧氣、無(wú)菌等和滲透壓等條件（至少寫(xiě)兩個(gè)）．
（2）在培養(yǎng)洗衣機(jī)中細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)在接種前檢測(cè)固體培養(yǎng)基是否被污染，具體檢測(cè)的方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生．
（3）圖2是平板劃線法接種操作示意圖，操作順序是A→B→E→D→C→F（用字母和箭頭表示）；以上操作中存在錯(cuò)誤的步驟是C（用字母表示）．
（4）將以上接種后的平板置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)需倒置，原因是防止皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染．
（5）在檢測(cè)洗衣機(jī)的污垢中是否含微生物時(shí)，也有同學(xué)先將污垢制成一定濃度的水樣溶液，然后用移液槍取0．lmL菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，這種方法稱(chēng)為稀釋涂布平板法．經(jīng)一段時(shí)間培養(yǎng)后，該同學(xué)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)該培養(yǎng)皿中共有57個(gè)菌落（如圖3），他得出的結(jié)論是0．lml菌液中有57個(gè)細(xì)菌，你認(rèn)為他的判斷是否正確，說(shuō)明原因．不正確，應(yīng)大于或等于57個(gè)細(xì)菌，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落．
（6）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，此目的是防止造成環(huán)境污染．

Answer 1

分析 分析圖1：圖示表示倒平板過(guò)程．
分析圖2：平板劃線操作：①挑取他含菌樣品：選用平整、圓滑的接種環(huán)，按無(wú)菌操作法挑取少量菌種．②劃A區(qū)：將平板倒置于煤氣（酒精）燈旁，左手拿出皿底并盡量使平板垂直于桌面，有培養(yǎng)基一面向著煤氣燈（這時(shí)皿蓋朝上，仍留在煤氣燈旁），右手拿接種環(huán)先在A區(qū)劃3-4條連續(xù)的平行線（線條多少應(yīng)依挑菌量的多少面定）．劃完A區(qū)后應(yīng)立即燒掉環(huán)上的殘菌，以免因菌過(guò)多而影響后面各區(qū)的分離效果．在燒接種環(huán)時(shí)，左手持皿底并將其覆蓋在皿蓋上方（不要放入皿蓋內(nèi)），以防止雜菌的污染．③劃其他區(qū)：將燒去殘菌后的接種環(huán)在平板培養(yǎng)基邊緣冷卻一下，并使B區(qū)轉(zhuǎn)到上方，接種環(huán)通過(guò)A區(qū)（菌源區(qū)）將菌帶到B區(qū)，隨即劃數(shù)條致密的平行線．再?gòu)腂區(qū)作C區(qū)的劃線．最后經(jīng)C區(qū)作D區(qū)的劃線，D區(qū)的線條應(yīng)與A區(qū)平行，但劃D區(qū)時(shí)切勿重新接觸A、B區(qū)，以免極該兩區(qū)中濃密的菌液帶到D區(qū)，影響單菌落的形成．隨即將皿底放入皿蓋中．燒去接種環(huán)上的殘菌．④等平板凝固后，將平板倒置．因此，正確的順序?yàn)锳→B→E→D→C→F．
分析圖3：圖3采用的是稀釋涂布平板法．

解答 解：（1）圖1所示是倒平板過(guò)程；若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)洗衣機(jī)中滋生的細(xì)菌時(shí)，除考慮各種營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、pH、氧氣、無(wú)菌等和滲透壓等條件．
（2）檢測(cè)固體培養(yǎng)基是否被污染的方法是：將未接種的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生．
（3）圖2是平板劃線法接種操作示意圖，由以上分析可知，其操作順序是A→B→E→D→C→F；為了防止雜菌污染，接種應(yīng)該在酒精燈的火焰旁進(jìn)行，因此以上操作中存在錯(cuò)誤的步驟是C．
（4）為了防止皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，需要將以上接種后的平板置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)需倒置．
（5）在檢測(cè)洗衣機(jī)的污垢中是否含微生物時(shí)，也有同學(xué)先將污垢制成一定濃度的水樣溶液，然后用移液槍取0．lmL菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，這種方法稱(chēng)為稀釋涂布平板法．采用該方法計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此計(jì)數(shù)的結(jié)果比實(shí)際值偏�。�
（6）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，此目的是防止造成環(huán)境污染．
故答案為：
（1）倒平板      溫度、pH、氧氣、無(wú)菌等
（2）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生
（3）E→D→C→F       C
（4）防止皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染
（5）稀釋涂布平板法        不正確，應(yīng)大于或等于57個(gè)細(xì)菌，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落
（6）防止造成環(huán)境污染

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記接種微生物常用的兩種方法；識(shí)記無(wú)菌技術(shù)，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．