Question

9．回答下列有關(guān)基因工程的問(wèn)題．
蘇云金桿菌（Bt）能產(chǎn)生具有殺蟲(chóng)能力的毒素蛋白．圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過(guò)程示意圖（apm^r為抗氨芐青霉素基因），①～④表示過(guò)程．

（1）由HindⅢ酶切后，得到DNA片段的末端是C
A．             B．         C．   D． （2）將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，產(chǎn)生4種DNA片段，②過(guò)程可獲得2種重組質(zhì)粒．如果只用BamHⅠ酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得2種重組質(zhì)粒．
（3）該過(guò)程中Bt毒素蛋白基因插入質(zhì)粒后，不應(yīng)影響質(zhì)粒的ABD（多選，2分）
A．復(fù)制B．轉(zhuǎn)錄C．堿基對(duì)的數(shù)量D．抗性基因的表達(dá)
（4）此基因工程中大腸桿菌質(zhì)粒的作用是作為運(yùn)載體與Bt毒素蛋白基因重組，根瘤農(nóng)桿菌的作用是感染植物，將Bt毒素蛋白基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞內(nèi)．生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲(chóng)種群中的抗Bt毒素蛋白基因的基因頻率的增長(zhǎng)速率．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過(guò)程，其中①是含有目的基因的外液DNA分子，其中含有限制酶HindⅢ、BamHⅠ和BstⅠ的切割位點(diǎn)，且BamHⅠ和BstⅠ的識(shí)別序列相同；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程．③表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程；④表示目的基因的表達(dá)．

解答 解：（1）由HindⅢ酶識(shí)別序列為切后，因此，得到DNA片段的末端是．
（2）圖①中，從蘇云金桿菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3種DNA片段．而質(zhì)粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2種DNA片段，其中有1種與目的基因相同，所以反應(yīng)管中有4種DNA片段．因HindⅢ、BamHⅠHind切割質(zhì)�？尚纬蓛煞N長(zhǎng)度不同的片段，因此用DNA連接酶連接形成的重組質(zhì)粒有2種；而B(niǎo)amHⅠ切割質(zhì)粒只能形成一種長(zhǎng)度的片段，但可能會(huì)出現(xiàn)正向和反向連接，所以用DNA連接酶能連接形成2種重組質(zhì)粒．
（3）質(zhì)粒要能進(jìn)行復(fù)制才能得到更多的表達(dá)產(chǎn)物，所以構(gòu)建基因表達(dá)載體后，不能影響質(zhì)粒的復(fù)制、表達(dá)和抗性基因的表達(dá)．
（4）大腸桿菌質(zhì)�？勺鬟\(yùn)載體，與與Bt毒素蛋白基因重組形成基因表達(dá)載體．根瘤農(nóng)桿菌可以感染植物，將Bt毒素蛋白基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞內(nèi)，即農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．轉(zhuǎn)基因與非轉(zhuǎn)基因作物混種，可降低抗性作物對(duì)害蟲(chóng)的選擇性，使害蟲(chóng)種群中的抗性基因頻率增長(zhǎng)率減慢．
故答案為：
（1）C
（2）4     2    2
（3）ABD
（4）作為運(yùn)載體與Bt毒素蛋白基因重組         感染植物，將Bt毒素蛋白基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞內(nèi)    抗Bt毒素蛋白

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過(guò)程圖，考查基因工程、酶、生物進(jìn)化等相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，能根據(jù)圖中質(zhì)粒和外源DNA分子上的酶切位點(diǎn)，解答第（1）（2）題；還要考生識(shí)記酶的特性，掌握生物進(jìn)化的相關(guān)知識(shí)．