Question

9．回答下列有關基因工程的問題．
蘇云金桿菌（Bt）能產生具有殺蟲能力的毒素蛋白．圖是轉Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖（apm^r為抗氨芐青霉素基因），①～④表示過程．

（1）由HindⅢ酶切后，得到DNA片段的末端是C
A．             B．         C．   D． （2）將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，產生4種DNA片段，②過程可獲得2種重組質粒．如果只用BamHⅠ酶切，目的基因與質粒連接后可獲得2種重組質粒．
（3）該過程中Bt毒素蛋白基因插入質粒后，不應影響質粒的ABD（多選，2分）
A．復制B．轉錄C．堿基對的數量D．抗性基因的表達
（4）此基因工程中大腸桿菌質粒的作用是作為運載體與Bt毒素蛋白基因重組，根瘤農桿菌的作用是感染植物，將Bt毒素蛋白基因轉入植物細胞內．生產上常將上述轉基因作物與非轉基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的抗Bt毒素蛋白基因的基因頻率的增長速率．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示轉Bt毒素蛋白基因植物的培育過程，其中①是含有目的基因的外液DNA分子，其中含有限制酶HindⅢ、BamHⅠ和BstⅠ的切割位點，且BamHⅠ和BstⅠ的識別序列相同；②表示基因表達載體的構建過程．③表示采用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞的過程；④表示目的基因的表達．

解答 解：（1）由HindⅢ酶識別序列為切后，因此，得到DNA片段的末端是．
（2）圖①中，從蘇云金桿菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3種DNA片段．而質粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2種DNA片段，其中有1種與目的基因相同，所以反應管中有4種DNA片段．因HindⅢ、BamHⅠHind切割質�？尚纬蓛煞N長度不同的片段，因此用DNA連接酶連接形成的重組質粒有2種；而BamHⅠ切割質粒只能形成一種長度的片段，但可能會出現正向和反向連接，所以用DNA連接酶能連接形成2種重組質粒．
（3）質粒要能進行復制才能得到更多的表達產物，所以構建基因表達載體后，不能影響質粒的復制、表達和抗性基因的表達．
（4）大腸桿菌質�？勺鬟\載體，與與Bt毒素蛋白基因重組形成基因表達載體．根瘤農桿菌可以感染植物，將Bt毒素蛋白基因轉入植物細胞內，即農桿菌轉化法．轉基因與非轉基因作物混種，可降低抗性作物對害蟲的選擇性，使害蟲種群中的抗性基因頻率增長率減慢．
故答案為：
（1）C
（2）4     2    2
（3）ABD
（4）作為運載體與Bt毒素蛋白基因重組         感染植物，將Bt毒素蛋白基因轉入植物細胞內    抗Bt毒素蛋白

點評 本題結合轉Bt毒素蛋白基因植物的培育過程圖，考查基因工程、酶、生物進化等相關知識，要求考生識記基因工程的相關知識點，能根據圖中質粒和外源DNA分子上的酶切位點，解答第（1）（2）題；還要考生識記酶的特性，掌握生物進化的相關知識．