Question

血栓主要由不溶性的纖維蛋白等物質(zhì)組成．納豆激酶（NK）是一種在納豆發(fā)酵過程中由納豆菌產(chǎn)生的蛋白酶，它不但能直接作用于纖維蛋白（A過程），還能間接激活體內(nèi)纖溶酶原（B過程）．如圖是有關(guān)納豆激酶溶栓機(jī)理簡圖，請據(jù)圖回答問題：

（1）人們所需的納豆激酶必需通過分離提純才能獲得，下面是分離提純的步驟，其基本順序是

 

．
①層析提純  ②過濾   ③沉淀   ④破碎細(xì)胞  ⑤酶制劑  ⑥冷凍干燥
使酶蛋白沉淀通常采用改變pH或加入

 

．
（2）研究NK直接水解作用：給定纖維蛋白平板，將

 

滴加其上，若出現(xiàn)相應(yīng)的溶解圈，則可說明

 

．
（3）NK 的間接作用是通過

 

激活體內(nèi)纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓．
（4）請根據(jù)下列給出的實(shí)驗(yàn)材料，比較NK與內(nèi)源性纖溶酶溶栓效果，并在表格空白位置上，補(bǔ)全相應(yīng)內(nèi)容．
供選實(shí)驗(yàn)材料：NK溶液、內(nèi)源性纖溶酶溶液、纖維蛋白塊、蛋清溶液，緩沖液、雙縮脲試劑、量筒、試管和秒表．
實(shí)驗(yàn)步驟：（“+”表示添加，“-”表示未添加）

	加入物質(zhì)的成分	試管1	試管2
1	A	+	+
2	緩沖液	+	+
3	納豆激酶（NK）溶液	+	-
4	B	-	+

2格中A處添加的物質(zhì)是

 

，B處添加的物質(zhì)是

 

．
②實(shí)驗(yàn)結(jié)果的鑒定所用的觀察方法是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：蛋白質(zhì)的提取和分離,蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能的綜合

專題：

分析：本題是對蛋白質(zhì)的提取和分離過程、探究NK與內(nèi)源性纖溶酶溶栓效果的實(shí)驗(yàn)的綜合性考查，回憶蛋白質(zhì)的提取和分離過程，結(jié)合題干和題圖信息解答（1）、（2）、（3）題；對于（4），可以從實(shí)驗(yàn)?zāi)康某霭l(fā)分析實(shí)驗(yàn)的自變量、因變量和無關(guān)變量，按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的單一變量原則和對照原則完善實(shí)驗(yàn)步驟預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果獲取結(jié)論．

解答： 解：（1）由題意知，納豆激酶（NK）是由納豆菌產(chǎn)生的蛋白酶，因此納豆激酶分離提純的過程是先破碎細(xì)胞釋放納豆激酶，然后經(jīng)過過濾、沉淀，層析提純，再通過冷凍干燥獲得酶制劑；使酶蛋白沉淀的常用方法是改變PH或加入硫酸銨．
（2）分析題圖可知，納豆激酶（NK）能直接作用于纖維蛋白，使纖維蛋白降解；將納豆激酶（或NK）滴加在給定纖維蛋白平板上，可以檢驗(yàn)納豆激酶（NK）直接降解纖維蛋白的作用，如果現(xiàn)相應(yīng)的溶解圈，說明NK對纖維蛋白有直接水解作用或降解作用（NK在體外有溶栓效果）．
（3）分析題圖可知，納豆激酶（或NK）可以刺激血管上皮細(xì)胞，使血管上皮細(xì)胞釋放組織纖溶酶原激活劑激活體內(nèi)纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓．
（4）①分析題干信息可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是比較NK與內(nèi)源性纖溶酶溶栓效果，因此實(shí)驗(yàn)的自變量是酶的種類，因變量是纖維蛋白塊的消失的時(shí)間，其他如試驗(yàn)用的纖維蛋白塊大小、緩沖液的濃度和體積、酶的濃度和體積屬于無關(guān)變量，無關(guān)變量應(yīng)該保持一致．，因此A處加入的物質(zhì)應(yīng)該是纖維蛋白塊，B加入的物質(zhì)是內(nèi)源性纖溶酶溶液．
②通過比較蛋白塊消失的時(shí)間的長短比較NK與內(nèi)源性纖溶酶溶栓效果．
故答案為：
（1）④②③①⑥⑤硫酸銨
（2）納豆激酶（或NK）       NK對纖維蛋白有直接水解作用或降解作用（NK在體外有溶栓效果）
（3）刺激血管上皮細(xì)胞，釋放組織纖溶酶原激活劑
（4）①纖維蛋白塊、內(nèi)源性纖溶酶溶液   
 ②觀察記錄蛋白塊消失的時(shí)間

點(diǎn)評：對本題的知識點(diǎn)是蛋白質(zhì)的提取和分離過程，對實(shí)驗(yàn)變量的分析和控制，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的對照原則與單一變量原則，對相關(guān)知識點(diǎn)的掌握和應(yīng)用并把握知識點(diǎn)間的內(nèi)在聯(lián)系是解題的關(guān)鍵．