Question

13．（1）利用平板劃線法法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．在進行細菌純化培養(yǎng)過程中，經(jīng)過培養(yǎng)之后，可以觀察到在3（填圖1中編號）區(qū)域出現(xiàn)單個菌落，產(chǎn)生該菌落的最初細菌數(shù)目有1個細菌．將乳酸菌接種到徹底滅菌的固體培養(yǎng)基上，要使其正常生長必須給予的條件是無氧環(huán)境．

（2）該接種法使用的工具是（圖2）A．
（3）該工具最合適的滅菌方法是A．
A．火焰灼燒   B．高溫高壓滅菌   C．酒精擦拭    D．紫外線照射．

Answer 1

分析 1、平板劃線的操作的基本步驟是：
（1）右手持接種環(huán)，經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將以冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口過火焰丙塞上棉塞．
（2）左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應劃破培養(yǎng)基表面．
（3）燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復以上操作，在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連．
（4）將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．
3、消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

解答 解：（1）圖1中采用的接種方法是平板劃線法，該方法可以把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．隨著劃線的進行，菌落數(shù)越來越少，因此經(jīng)過培養(yǎng)之后，可以觀察到在3區(qū)域出現(xiàn)單個菌落；菌落是由一個細菌繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，因此產(chǎn)生該菌落的最初細菌數(shù)目是1個．乳酸菌屬于厭氧菌，因此將乳酸菌接種到徹底滅菌的固體培養(yǎng)基上，要使其正常生長必須給予的條件是無氧環(huán)境．
（2）平板劃線法采用的接種工具是接種環(huán)，即圖2中A．
（3）微生物的接種工具常用灼燒滅菌法滅菌．
故答案為：
（1）平板劃線法    3      1       無氧環(huán)境
（2）A   
（3）A

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記無菌技術；識記培養(yǎng)基的成分、類型及功能；識記接種微生物常用的兩種方法，能結(jié)合圖中信息準確答題．