Question

13．海棲熱袍菌生活在55～90℃的海底火山口處水域，其產(chǎn)生的乳酸脫氫酶（LDH）具有極強(qiáng)耐熱性．研究人員利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)該酶以用于工業(yè)制備NAD⁺（一種輔酶），基本技術(shù)流程如圖．請(qǐng)回答：

（1）過程①中，應(yīng)提取海棲熱袍菌的基因組DNA作模板；同時(shí)根據(jù)LDH（或目的）基因的核苷酸序列合成引物，過程①中使用的工具酶為Taq酶
（2）進(jìn)行過程③前，利用Ca²⁺（或CaCl₂）處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞．
（3）過程④中，應(yīng)將大腸桿菌置于42℃條件下誘導(dǎo)培養(yǎng)；然后提取大腸桿菌的蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，以鑒定目的基因是否成功表達(dá)，此方法稱為抗原-抗體雜交法．

Answer 1

分析 分析題圖：圖中①表示獲取目的基因的過程，②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程，④表示目的基因的檢測(cè)和表達(dá)．

解答 解：（1）分析過程圖可知，過程①是利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，應(yīng)提取海棲熱袍菌的基因組DNA作模板；同時(shí)根據(jù)LDH（或目的）基因的核苷酸序列合成引物，該過程①中使用的工具酶為耐高溫的Taq酶．
（2）過程③是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，需利用Ca²⁺（或CaCl₂）處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞．
（3）過程④是目的基因的檢測(cè)與鑒定，根據(jù)42℃條件下啟動(dòng)子活性完全激發(fā)的特點(diǎn)，應(yīng)將大腸桿菌置于42℃條件下誘導(dǎo)培養(yǎng)；然后提取大腸桿菌的蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，以鑒定目的基因是否成功表達(dá)，此方法稱為抗原-抗體雜交法．
故答案為
（1）海棲熱袍菌     LDH（或目的）    Taq酶    
（2）Ca²⁺（或CaCl₂）
（3）42℃蛋白質(zhì)     抗原-抗體雜交法

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．