Question

15．單克隆抗體可用于疾病診斷和治療，制備H7N9病毒單克隆抗體的流程如圖：

（1）過程③常用的方法是顯微注射．
（2）向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生體液免疫．從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞I是B細(xì)胞（或漿細(xì)胞或已免疫的B細(xì)胞），細(xì)胞II應(yīng)具有的特點(diǎn)是既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
（3）體外培養(yǎng)細(xì)胞II，首先應(yīng)保證其處于無菌、無毒的環(huán)境，其次需要提供充足的營養(yǎng)和適宜的溫度，通常需加入血清、血漿等天然成分；為了保證氣體環(huán)境，培養(yǎng)箱中的氣體組成為95%空氣加5%CO₂．
（4）細(xì)胞融合后需在選擇性（HAT）培養(yǎng)基篩選出細(xì)胞II，然后對細(xì)胞II還需進(jìn)行的操作是克隆化培養(yǎng)和抗體檢測．
（5）若要預(yù)防H7N9禽流感，可用圖中的H7N9抗原蛋白作為疫苗．

Answer 1

分析 1、基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．目的基因?qū)�入動物�?xì)胞的方法是顯微注射法．檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)．
2、單克隆抗體的制備流程：人工誘導(dǎo)經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞得到單克隆抗體．
3、動物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件
（1）充足的營養(yǎng)供給--微量元素、無機(jī)鹽、糖類、氨基酸、促生長因子、血清等．
（2）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（3）無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理．通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染．此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO₂．O₂是細(xì)胞代謝所必需的，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．

解答 解：（1）將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（2）向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，這是體液免疫，從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞Ⅰ是B細(xì)胞（漿細(xì)胞或已免疫B細(xì)胞），將無限增殖的基因?qū)�入漿細(xì)胞，得到的細(xì)胞Ⅱ應(yīng)具有的特點(diǎn)是既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
（3）體外培養(yǎng)細(xì)胞Ⅱ，首先應(yīng)保證其處于的無菌無毒環(huán)境，其次需要提供充足的營養(yǎng)、適宜的溫度，為了保證營養(yǎng)充足，還需要在培養(yǎng)基中加入動物血清、血漿；為了保證氣體環(huán)境，培養(yǎng)箱中的氣體組成為95%空氣加5%CO₂．
（4）動物細(xì)胞融合后，需要用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；對于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞Ⅱ還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和檢測（專一）抗體．
（5）疫苗為毒性弱的抗原，因此要預(yù)防H7N9禽流感，可以用圖中的H7N9抗原蛋白作為疫苗．
故答案為：
（1）顯微注射
（2）體液    B細(xì)胞（或漿細(xì)胞或已免疫的B細(xì)胞）    既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體
（3）無菌、無毒    血清、血漿    95%空氣加5%CO₂
（4）選擇性（HAT）    克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
（5）H7N9抗原蛋白

點(diǎn)評 本題考查基因工程和單克隆抗體的制備有關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟；識記單克隆抗體制備的原理、過程，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題．