Question

2．氯苯化合物是重要的有機化工原料，因其不易降解，會污染環(huán)境．某研究小組依照如圖1所示實驗方案篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌．培養(yǎng)基配方如表1．

表1培養(yǎng)基的組成

液體培養(yǎng)基	蛋白胨	牛肉膏	氯苯	氯化鈉	硝酸銨	無機鹽（無碳）	蒸餾水
Ⅰ號	10g	5g	5mg	5g	…	…	1L
Ⅱ號	…	…	50mg	5g	3g	適量	1L
Ⅲ號	…	…	20-80mg	5g	3g	適量	1L

（1）從用途上來說，Ⅱ號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，在Ⅱ號培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是硝酸銨．配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時，除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外，還應添加1%的瓊脂．在Ⅱ號培養(yǎng)基的倒平板操作時，平板冷凝后，應將平板倒過來放置，這樣做的目的是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基．
（2）培養(yǎng)基配制時，滅菌與調pH的先后順序是先調pH，后滅菌．實驗室中，培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌．
（3）將Ⅰ號培養(yǎng)基中的微生物接種Ⅱ號培養(yǎng)基中，采用的最佳接種方法是稀釋涂布平板法，到將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長曲線如圖2所示，此過程采用抽樣檢測法（血球計數(shù)板計數(shù)法）（方法）統(tǒng)計菌體數(shù)．從圖中可知，SP1菌在20mg/L氯苯培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是碳源最早耗盡．

Answer 1

分析 （1）培養(yǎng)基為微生物提供生長、繁殖和積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質．營養(yǎng)物質歸納為碳源、氮源、生長因子、無機鹽和水．根據(jù)化學成分分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基等根據(jù)用途分選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基．根據(jù)性質分為液體、半固體和固體培養(yǎng)基．
（2）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟：計算、稱量、溶化、調整PH、滅菌、倒平板．

解答 解：（1）Ⅰ號培養(yǎng)基是為了獲得更多的菌株，屬于通用培養(yǎng)基，選擇的作用不是很強，因為在培養(yǎng)基中含有蛋白胨和牛肉膏；Ⅱ號培養(yǎng)基是為選擇出SP1菌株，屬于選擇培養(yǎng)基，因為碳源只能利用氯苯，不能利用氯苯的不能生存，Ⅱ號培養(yǎng)基成分中含氮物質為硝酸銨，可以為SP1菌株提供氮源．固體培養(yǎng)基需要添加凝固劑，常用的凝固劑是瓊脂，平板倒過來放置的目的是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基．
（2）為了防止雜菌污染，配置培養(yǎng)基時，應該先調節(jié)pH，然后滅菌．實驗室中，培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌．
（3）據(jù)圖分析，將Ⅰ號培養(yǎng)基中的微生物接種Ⅱ號培養(yǎng)基中，采用的最佳接種方法是稀釋涂布平板法．SP1菌的計數(shù)常用抽樣檢測法（血球計數(shù)板計數(shù)法）．SP1菌株是以氯苯為碳源，當氯苯消耗盡時，菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存，故氯苯含量越少，SP1菌株越早停止生長．
故答案為：
（1）選擇     硝酸銨      瓊脂     防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基
（2）先調pH，后滅菌      高壓蒸汽滅菌
（3）稀釋涂布平板法     抽樣檢測法（血球計數(shù)板計數(shù)法）    20mg/L氯苯          碳源最早耗盡

點評 本題綜合微生物的培養(yǎng)及實驗設計和分析能力，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系的能力；能運用所學知識與觀點，對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論的能力；對實驗現(xiàn)象和結果進行解釋、分析、處理的能力．