Question

10．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在動(dòng)物細(xì)胞工程的其他技術(shù)中都得廣泛應(yīng)用．下面是與動(dòng)物細(xì)胞工程相關(guān)的問題，請(qǐng)分析回答：
（1）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要將動(dòng)物組織剪碎，然后用胰蛋白酶處理，以分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保證細(xì)胞必需的營養(yǎng)、適宜的溫度和pH條件，還要提供無菌、無毒和適宜的氣體環(huán)境．為達(dá)到無菌、無毒的環(huán)境條件，除了要對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具進(jìn)行消毒外，還要①在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，②定期更換培養(yǎng)液．氣體環(huán)境中CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（3）應(yīng)用于核移植的供體細(xì)胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生突變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)）．

Answer 1

分析 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．
2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理．通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染．此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害．②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等．通常需加入血清、血漿等天然成分．③溫度：適宜溫度：哺乳動(dòng)物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4．④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO₂．O₂是細(xì)胞代謝所必需的，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．

解答 解：（1）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要將動(dòng)物組織剪碎，然后用胰蛋白酶處理，以使其分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液．
（2）為達(dá)到無菌、無毒的環(huán)境條件，除了要對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具進(jìn)行消毒外，還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染．此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害．氣體環(huán)境中CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（3）10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生突變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)），因此一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞應(yīng)用于核移植的供體細(xì)胞．
故答案為：
（1）胰蛋白酶
（2）在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素           定期更換培養(yǎng)液             維持培養(yǎng)液的pH
（3）10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生突變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)）

點(diǎn)評(píng) 本題考查了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問題的能力，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．