Question

10．如圖為單克隆抗體制備流程示意圖．

（1）動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)．
（2）細(xì)胞融合是隨機的過程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是篩選雜交瘤細(xì)胞．在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加無機鹽，但要注意無機鹽的種類和濃度，以保證生命活動的正常進(jìn)行．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7～10個細(xì)胞/mL，每孔滴入0.1mL細(xì)胞稀釋液，其目的是使每個小孔內(nèi)不多于一個細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體純度）．
（4）選出的雜交瘤細(xì)胞具備在體外大量增殖、分泌特異性抗體特點．（5）淋巴細(xì)胞是由動物體骨髓中的造血干細(xì)胞分化、發(fā)育而．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．
2、兩次篩選：篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．
3、動物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理．通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染．此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害．②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等．通常需加入血清、血漿等天然成分．
③溫度：適宜溫度：哺乳動物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4．④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO₂．O₂是細(xì)胞代謝所必需的，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
4、據(jù)圖分析，①過程是將特定的抗原注射小鼠，篩選出產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞；②過程是誘導(dǎo)細(xì)胞融合；③過程是篩選出雜交瘤細(xì)胞：B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，轉(zhuǎn)移到HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，未融合的細(xì)胞死亡，而雜交瘤細(xì)胞存活；④過程是獲得能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞．

解答 解：（1）動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是低溫細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)．
（2）細(xì)胞融合是隨機的過程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是篩選雜交瘤細(xì)胞，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加無機鹽，但要注意無機鹽的種類和濃度，以保證生命活動的正常進(jìn)行．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7～10個細(xì)胞/mL，每孔滴入0.1mL細(xì)胞稀釋液，其目的是使每個小孔內(nèi)不多于一個細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體純度）．
（4）雜交瘤細(xì)胞具備在體外大量增殖、分泌特異性抗體的特點．
（5）淋巴細(xì)胞是由動物體骨髓中的造血干細(xì)胞分化、發(fā)育而來的．
故答案為：
（1）動物細(xì)胞培養(yǎng)    
（2）篩選雜交瘤細(xì)胞    種類和濃度
（3）使每個小孔內(nèi)不多于一個細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的
（或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體純度）
（4）在體外大量增殖    分泌特異性抗體
（5）骨髓    造血干

點評 本題以單克隆抗體制備流程階段示意圖為載體，考查單克隆抗體制備的過程，動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運用所學(xué)知識，對生物學(xué)問題作出準(zhǔn)確的判斷，難度不大．