Question

17．科研人員為了分離、篩選藍莓果酒專用酵母來改善藍霉果酒的品質(zhì)，進行了如下實驗：
①取不同品種成熟藍莓制果漿，置于恒溫培養(yǎng)箱中自然發(fā)酵，直至產(chǎn)生大量氣泡和明顯酒味
②將藍莓發(fā)酵液梯度稀釋后，進行涂布平板操作，每個梯度3個平板，并在恒溫下培養(yǎng)2d，根據(jù)酵母菌菌落特征挑取單菌落．
③將挑取的單菌落擴大培養(yǎng)后，通過平板劃線法分離純化并保存．
④檢測篩選菌株的發(fā)酵性能，得到如下實驗結(jié)果．

品 種	乙醇體積分數(shù)/%					pH
	8%	10%	12%	14%	15%	4.00	2.98	2.03	1.48
葡萄釀酒酵母	++++	++++	+	-	-	++++	++++	-	-
BL-21	++++	++++	+	-	-	++++	++++	-	-
BF-09	++++	++++	++	-	-	++++	++++	+	-
BF-17	++++	++++	++	+	-	++++	++++	++	-

注：“-”表示不產(chǎn)氣；“+”表示產(chǎn)氣，“+”越多產(chǎn)氣越多．
分析回答：
（1）酵母細胞中能產(chǎn)生CO₂的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體．步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度控制在22℃左右，其主要目的是為酵母菌細胞生長、繁殖提供適宜的溫度．酵母菌與果醋發(fā)酵所需的微生物在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是含有核膜包被的細胞核；酵母菌的新陳代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型
（2）步驟②中，發(fā)酵液應使用無菌水 進行梯度稀釋．稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的菌種分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落．“一個菌落”在生態(tài)學中屬于一個種群（種群或群落）．
（3）步驟③平板劃線時，每次劃線前后都要用灼燒 法對接種環(huán)進行滅菌．
（4）根據(jù)實驗結(jié)果推知，BF-17 （品種）是較理想的釀酒菌種．

Answer 1

分析 1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧條件下，反應式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；            
（2）在無氧條件下，反應式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面，進行培養(yǎng)；在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落．

解答 解：（1）酵母細胞既能進行有氧呼吸，也能進行無氧呼吸，所以產(chǎn)生CO₂的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體．酵母菌生長的適宜溫度是18-25℃，所以步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度控制在22℃左右的目的是為酵母菌細胞生長、繁殖提供適宜的溫度．酵母菌（真核生物）與果醋（原核生物）發(fā)酵所需的微生物在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是含有核膜包被的細胞核；酵母菌的新陳代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型．
（2）步驟②中，發(fā)酵液應使用無菌水進行梯度稀釋．稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的菌種分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落．“一個菌落”在生態(tài)學中屬于一個種群．
（3）步驟③平板劃線時，每次劃線前后都要用灼燒法對接種環(huán)進行滅菌．
（4）根據(jù)題意和圖表分析可知：品種BF-17是較理想的釀酒菌種．
故答案為：
（1）細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體    為酵母菌細胞生長、繁殖提供適宜的溫度     含有核膜包被的細胞核        異養(yǎng)兼性厭氧型
（2）無菌水     單個細胞     種群
（3）灼燒
（4）BF-17

點評 本題考查果酒的制作的相關知識，要求考生識記參與果酒制作的微生物及其代謝類型，掌握果酒制作的原理及操作條件，能結(jié)合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．