Question

12．苦蕎是一種有名的經(jīng)濟(jì)植物，其含有的黃酮類(lèi)化合物具有降血糖，血脂等功效．CHS是合成黃酮類(lèi)化合物的關(guān)鍵酶．有人把經(jīng)修飾的CHS基因?qū)�入苦蕎細(xì)胞中，培育高產(chǎn)黃酮苦養(yǎng)品系．按圖示回答：

（1）過(guò)程①中將修飾后的CHS基因與Ti質(zhì)粒連接成重組Ti質(zhì)粒需要的酶是限制酶和DNA連接酶．
（2）圖中將修飾后的CHS基因?qū)�入苦蕎體細(xì)胞的方法稱為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，除此以外還可以利用的方法有基因槍法、花粉管通道法．
（3）對(duì)過(guò)程②操作前，需先用Ca²⁺處理農(nóng)桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞．通過(guò)該菌的轉(zhuǎn)化作用使CHS基因進(jìn)入苦蕎體細(xì)胞并插入到細(xì)胞的染色體DNA（DNA）上．
（4）檢測(cè)轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功，不能用抗原一抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)的原因是轉(zhuǎn)基因苦蕎植株與普通苦蕎植株都含有黃酮類(lèi)化合物，可以比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類(lèi)化合物含量或測(cè)定細(xì)胞中CHS含量進(jìn)行鑒定．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是把經(jīng)修飾的CHS基因?qū)�入苦蕎細(xì)胞中，培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系的過(guò)程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，②表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌細(xì)胞的過(guò)程，③表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程．

解答 解：（1）①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，該過(guò)程首先需要用限制酶切割外源DNA和運(yùn)載體，其次還需要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA．
（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法、基因槍法，圖中將修飾后的CHS基因?qū)�入苦蕎體細(xì)胞采用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（3）將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞需要采用感受態(tài)細(xì)胞法，即需先用Ca²⁺處理農(nóng)桿菌，使其成為易于吸收周?chē)�環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞．通過(guò)該菌的轉(zhuǎn)化用使CHS基因進(jìn)入苦蕎體細(xì)胞并插入到細(xì)胞的染色體DNA 上．
（4）檢測(cè)轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功，不能用抗原--抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，原因是轉(zhuǎn)基因苦蕎植株與普通苦蕎植株都含有黃酮類(lèi)化合物，可以比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類(lèi)化合物含量或測(cè)定細(xì)胞中CHS含量進(jìn)行鑒定．
故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法    基因槍法、花粉管通道法
（3）感受態(tài)    轉(zhuǎn)化    染色體DNA （DNA）
（4）轉(zhuǎn)基因苦蕎植株與普通苦蕎植株都含有黃酮類(lèi)化合物     黃酮類(lèi)化合物

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟及相關(guān)細(xì)節(jié)，掌握基因工程技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．