Question

14．微生物與人類關(guān)系密切，雖然有些微生物能使動(dòng)植物患病，但多數(shù)微生物對(duì)人類是有益的，請(qǐng)回答下列有關(guān)問題．
（1）如表為兩種微生物的培養(yǎng)基配方．
A培養(yǎng)基

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g

B培養(yǎng)基

纖維 素粉	NaNO3	Na2HPO4• 7H2O	KH2PO4	MgSO4• 7H2O	KCl	酵母膏	水解酪素
5g	1g	1.2g	0.9g	0.5g	0.5g	0.5g	0.5g

上述兩種培養(yǎng)基中的物質(zhì)溶解后，均用蒸餾水定容到1 000mL．
①如果要進(jìn)行土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離，則需要選擇上述哪種培養(yǎng)基？A，該培養(yǎng)基能分離尿素分解菌的原因是培養(yǎng)基中尿素為唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能生長(zhǎng)．
②在該培養(yǎng)基中可加入酚紅指示劑，根據(jù)指示劑的顏色可鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素．
③無論配制何種培養(yǎng)基，在原料稱量．溶解之后要，然后分裝．包扎并滅菌，常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌．從功能上來看，上述兩種培養(yǎng)基均屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）把牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基倒入平板，等培養(yǎng)基冷凝后，應(yīng)將平板倒過來放置，這樣做的目的是可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染．
（3）微生物接種的方法很多，平板劃線法操作結(jié)束時(shí)，為什么仍需要灼燒接種環(huán)？殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對(duì)異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
3、分析表A，該培養(yǎng)基中以尿素作為唯一氮源，因此屬于選擇培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基可以選擇尿素分解菌；
分析表B，該培養(yǎng)基中以纖維素作為唯一碳源，同樣也屬于選擇培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基可以選擇纖維素分解菌．

解答 解：（1）①分析表格可知，培養(yǎng)基A中以尿素為唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能生長(zhǎng)，因此可以用于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離．
②由于細(xì)菌分解在尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，PH升高，所以可以用檢測(cè)pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產(chǎn)生氨，PH升高，指示劑變紅．
③培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌．由分析可知，從功能上來看，上述兩種培養(yǎng)基均屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）把牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基倒入平板，等培養(yǎng)基冷凝后，應(yīng)將平板倒過來放置，防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染．
（3）平板劃線法操作結(jié)束時(shí)，仍需要灼燒接種環(huán)，以殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者．
故答案為：
（1）①A    培養(yǎng)基中尿素為唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能生長(zhǎng)
②酚紅 
③高壓蒸汽滅菌     選擇
（2）倒過來     皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基
（3）殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查微生物的實(shí)驗(yàn)室分離和培養(yǎng)，要求考生能夠掌握微生物分離與純化的方法，能夠根據(jù)培養(yǎng)基的配方確定培養(yǎng)的類型，掌握尿素分解菌分離和鑒定的方法，再結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題．