Question

2．科研人員先分別PCR擴(kuò)增尿酸酶基因和原核生物胞外蛋白信號(hào)肽基因（編碼的肽鏈能引導(dǎo)新合成的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移、分泌），再將它們拼接形成融合基因，并導(dǎo)入大腸桿菌生產(chǎn)尿酸酶．相關(guān)敘述正確的是（　�。�

• A． 擴(kuò)增兩類(lèi)基因時(shí)可以通過(guò)設(shè)計(jì)引物來(lái)控制兩類(lèi)基因的拼接方向
• B． 構(gòu)建融合基因的目的是使大腸桿菌能合成尿酸酶并分泌到細(xì)胞外
• C． 融合基因?qū)�入大腸桿菌前需構(gòu)建基因表達(dá)載體，以保證目的基因正常表達(dá)和遺傳
• D． 在導(dǎo)入融合基因前，應(yīng)先用NaCl處理大腸桿菌，使其變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．
將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少，最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用 Ca²⁺處理細(xì)胞，使其成為 感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)和個(gè)體水平上的鑒定．

解答 解：A、每個(gè)基因的兩端都有啟動(dòng)子和終止子，它會(huì)調(diào)節(jié)基因的表達(dá)，因此擴(kuò)增兩類(lèi)基因時(shí)可以通過(guò)設(shè)計(jì)引物來(lái)控制兩類(lèi)基因的拼接方向，以便它們都能正常表達(dá)，A正確；
B、根據(jù)題干中原核生物胞外蛋白信號(hào)肽基因的功能可知，構(gòu)建融合基因的目的是使大腸桿菌能合成尿酸酶并分泌到細(xì)胞外，B正確；
C、融合基因?qū)�入大腸桿菌前需構(gòu)建基因表達(dá)載體，以保證目的基因正常表達(dá)和遺傳，C正確；
D、在導(dǎo)入融合基因前，應(yīng)先用CaCl₂處理大腸桿菌，使其變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞，D錯(cuò)誤．
故選：ABC．

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作步驟等，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確判斷各項(xiàng)．