Question

7．為了研究“某酸奶中乳酸菌耐藥情況”而制定的流程圖，請分析回答：

（1）本研究使用的細菌培養(yǎng)基中特別加入了一定量的碳酸鈣，乳酸菌在無氧呼吸（生理過程）中產生的乳酸能與不溶性的碳酸鈣生成可溶性的乳酸鈣，從而在菌落周圍形成溶鈣圈．從功能角度分析，本研究使用的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基．
（2）在利用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基滅菌時，鍋內水加熱煮沸后，必須將鍋內冷空氣徹底排除，以保證鍋內氣壓上升，達到121℃．滅菌后的培養(yǎng)基應適當冷卻后，在酒精燈火焰附近倒平板．
（3）在酸奶制作過程中要嚴格控制發(fā)酵條件是保證發(fā)酵正常進行的關鍵，通常所指的發(fā)酵條件包括無菌、密閉（無氧）（至少寫出兩項）．一般情況下含抗生素牛奶不宜制作酸奶，原因是抗生素抑制了乳酸菌的生長．
（4）請完善“檢測乳酸菌對青霉素、四環(huán)素耐藥性”實驗操作步驟：
步驟1：分別取等量的青霉素、四環(huán)素和無菌水加入滅菌后冷卻至50℃左右的三組無菌培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，立即混勻，靜置凝固成平板．
步驟2：向三組培養(yǎng)基中分別接種等量相同的待檢測的乳酸菌菌種．
步驟3：將接種后的三組培養(yǎng)基都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)若干天，觀察比較培養(yǎng)基中菌落生長情況．

Answer 1

分析 1、無菌技術的主要內容
①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌
③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；
④實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸．
2、酸奶發(fā)酵利用的是乳酸菌的無氧呼吸，乳酸菌無氧呼吸能夠產生乳酸．
3、實驗設計的原則是對照原則和單一變量原則．

解答 解：（1）乳酸菌只能進行無氧呼吸產生乳酸，產生的乳酸能與不溶性的碳酸鈣生成可溶性的乳酸鈣，從而在菌落周圍形成溶鈣圈．從功能角度分析，本研究使用的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基．
（2）在利用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基滅菌時，鍋內水加熱煮沸后，必須將鍋內冷空氣徹底排除，以保證鍋內氣壓上升，達到121℃．滅菌后的培養(yǎng)基應適當冷卻后，為了防止雜菌的污染，需要在酒精燈火焰附近倒平板．
（3）為了保證酸奶的品質，在酸奶發(fā)酵過程中需要防止雜菌的污染，即需要無菌發(fā)酵；酸奶制作利用的是酵母菌的無氧呼吸，因此需要嚴格控制無氧條件．抗生素會抑制乳酸菌的生長，因此一般情況下含抗生素牛奶不宜制作酸奶．
（4）步驟1：根據(jù)等量原則，應該分別取等量的青霉素、四環(huán)素和無菌水加入三組無菌培養(yǎng)皿中．
步驟3：根據(jù)對照原則，應該將接種后的三組培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)若干天作為對照試驗．
故答案為：
（1）無氧呼吸         鑒別培養(yǎng)基         
（2）將鍋內冷空氣徹底排除     酒精燈火焰
（3）無菌、密閉（無氧）     抗生素抑制了乳酸菌的生長
（4）步驟1：等量的青霉素、四環(huán)素和無菌水      步驟2：等量相同的待檢測的乳酸菌菌種

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生掌握無菌技術的主要內容，識記酸奶發(fā)酵的原理和方法，同時具有一定的實驗設計能力，并遵循單一變量和對照性原則．