Question

15．利用小鼠制備抗羊紅細(xì)胞的單克隆抗體，回答下列有關(guān)問題：
（1）取相應(yīng)B細(xì)胞前必需先給小鼠注射羊紅細(xì)胞，形象地說先“打針”，否則失敗．
（2）誘導(dǎo)融合的兩種細(xì)胞名稱及作用：免疫過的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）--產(chǎn)生抗體；骨髓瘤細(xì)胞一一大量增殖．
（3）誘導(dǎo)融合與原生質(zhì)融合的不同方法：滅活病毒誘導(dǎo)．
（4）兩次篩選的目的及方法：
①在特定的選擇性培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基上未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞才能生長．
②經(jīng)①篩選后的細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞，需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選后就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞．
（5）兩種培養(yǎng)提取場所：
①體外培養(yǎng)一一細(xì)胞培養(yǎng)液提�。�
②體內(nèi)小鼠腹腔中培養(yǎng)一一小鼠腹水中提�。�
（6）優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備．

Answer 1

分析 1、抗體：一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體．從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差．
2、單克隆抗體的制備
（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞
（2）獲得雜交瘤細(xì)胞
①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；
②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體．
（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖
（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取

解答 解：（1）取相應(yīng)B細(xì)胞前必需先給小鼠注射羊紅細(xì)胞，羊紅細(xì)胞作為抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的B細(xì)胞．
（2）免疫過的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）能產(chǎn)生抗體；骨髓瘤細(xì)胞具有大量增殖特征．
（3）動物細(xì)胞誘導(dǎo)融合與原生質(zhì)融合的不同方法：滅活病毒誘導(dǎo)．
（4）兩次篩選的目的及方法：
①在特定的選擇性培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基上未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞才能生長．
②經(jīng)①篩選后的細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞，需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選后就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞．
（6）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備．
故答案為：
（1）羊紅細(xì)胞
（2）免疫過的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）；大量增殖
（3）滅活病毒誘導(dǎo)
（4）①選擇性；雜交瘤細(xì)胞
②克隆化； 抗體
（6）特異性；靈敏度

點(diǎn)評 本題考查單克隆抗體制備相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識記和理解能力，需要學(xué)生理解加記憶．