Question

16．炭疽桿菌能引起人畜患炭疽�。畬μ烤也∫伤苹颊�，可通過甲圖所示鑒定炭疽桿菌的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確診，其中實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌．

（1）若要從炭疽病疑似患者體內(nèi)分離出炭疽桿菌，可將患者皮膚膿胞滲出物稀釋后滴于培養(yǎng)基表面，用無菌玻璃刮刀涂勻，該接種方法稱為涂布分離法．乙圖所示的四種菌落分布圖中，該接種方法不能得到的是D．
（2）制備甲圖中的液體培養(yǎng)基時(shí)需采取高壓蒸汽滅菌法滅菌．接種可疑菌后，需將三角瓶置于35℃下的搖床上振蕩培養(yǎng)24小時(shí)，可疑菌會大量繁殖，液體培養(yǎng)基變渾濁．
（3）甲圖中，對照組與實(shí)驗(yàn)組試管同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組低（高/低），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除．此判斷的依據(jù)是噬菌體侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌數(shù)量下降．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
2、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；
③高壓蒸汽滅菌：培養(yǎng)基一般采用該方法進(jìn)行滅菌．

解答 解：（1）根據(jù)題干信息可知，“用無菌玻璃刮刀涂勻”，表明該接種方法為稀釋涂布平板法，即為涂布分離法．分析乙圖可知，圖中ABC三個(gè)平板中菌落均均勻分布，只是菌落數(shù)不同，采用的是稀釋涂布平板法，而D平板運(yùn)用了平板劃線法．
（2）培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌法滅菌．接種可疑菌后，需將三角瓶置于35℃下的搖床上振蕩培養(yǎng)24小時(shí)，可疑菌會大量繁殖，液體培養(yǎng)基變渾濁．
（3）甲圖中，實(shí)驗(yàn)組中加入噬菌體液，由于噬菌體侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌數(shù)量下降，如果實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除．
故答案為：
（1）涂布分離法      D
（2）高壓蒸汽滅菌     振蕩
（3）低    噬菌體侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌數(shù)量下降

點(diǎn)評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生掌握微生物分離和純化的兩種方法，掌握無菌技術(shù)的主要內(nèi)容，能夠運(yùn)用噬菌體專一性的侵染細(xì)菌的知識儲備解決疑似患者是否被炭疽桿菌感染．