Question

7．毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KlFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)．獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程如圖．

（1）過程①構(gòu)建的重組表達載體除具有KlFⅡ基因外，還必須有啟動子、終止子以及標(biāo)記基因等．其中標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細胞中否含有目的基因．
（2）在過程②中，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理能將皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞．在培養(yǎng)過程中，需將成纖維細胞置于pH值約為7.2-7.4培養(yǎng)液中，并且放在含95%的空氣加5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)．
（3）在過程③中，卵母細胞除可從活體輸卵管中采集外．還可以從已宰殺的母羊卵巢中獲�。怀墒炻眩�母）細胞在核移植前需要進行去核處理，同時用微型吸管吸走第一極體．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程圖，其中①表示基因表達載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示動物細胞培養(yǎng)過程，該過程需要采用胰蛋白酶處理組織塊以獲得單個細胞；③表示卵母細胞的采集和培養(yǎng)過程．

解答 解：（1）基因表達載體包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子等，其中標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細胞中否含有目的基因．
（2）胰蛋白酶可將組織塊分散成單個細胞；在培養(yǎng)過程中，需將成纖維細胞置于pH值約為7.2-7.4培養(yǎng)液中；動物細胞培養(yǎng)過程中需要一定的氣體環(huán)境（95%氧氣和5%二氧化碳），其中5%CO₂的作用是維持培養(yǎng)基（液）的pH．
（3）③表示卵母細胞的采集，卵母細胞除可從活體輸卵管中采集外，還可以從已宰殺的母羊卵巢中獲取，但后者需要在體外培養(yǎng)成熟后才能參與受精；成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行去核處理，同時用微型吸管吸走第一極體．
故答案為：
（1）啟動子   終止子  標(biāo)記基因   鑒別受體細胞中否含有目的基因
（2）胰蛋白酶或膠原蛋白酶   7.2-7.4  5%CO₂
（3）輸卵管   卵巢   第一極體

點評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因山羊培育過程圖，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記所列知識要點，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．