Question

1．如圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線．圖中tet^R表示四環(huán)素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)．據(jù)圖回答：
（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用HindIII和BamHI限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行．
（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是A（填字母代號(hào)）．
A．啟動(dòng)子    B．tet^R    C．復(fù)制原點(diǎn)     D．a(chǎn)mp^R
（3）過(guò)程①可采用的操作方法是C（填字母代號(hào)）．
A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化     B．大腸桿菌轉(zhuǎn)化     C．顯微注射     D．細(xì)胞融合
（4）過(guò)程②是進(jìn)行胚胎體外培養(yǎng)，哺乳動(dòng)物胚胎的培養(yǎng)液成分中除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及（動(dòng)物）血清等物質(zhì)．
（5）為獲得多個(gè)遺傳性狀相同的個(gè)體，可以過(guò)程③實(shí)行胚胎分割移植技術(shù)．若針對(duì)囊胚期胚胎，需注意應(yīng)將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割．該技術(shù)可以獲得成功，利用了細(xì)胞的全能性．
（6）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用C（填字母代號(hào)）技術(shù)．
A．核酸分子雜交                B．基因序列分析
C．抗原-抗體雜交               D．PCR．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線，包括基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等步驟，其中過(guò)程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞；過(guò)程②需采用胚胎移植技術(shù)．

解答 解：（1）外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位點(diǎn)，其中限制酶SmaI的切割位點(diǎn)位于目的基因上，所以獲取目的基因和構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)用限制酶HindⅢ和BamHⅠ．用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割質(zhì)粒后，會(huì)破壞質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因，但不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行．
（2）啟動(dòng)子是能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列．
（3）過(guò)程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，當(dāng)受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（4）哺乳動(dòng)物胚胎的培養(yǎng)液成分中除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及動(dòng)物血清等物質(zhì)．
（5）來(lái)自同一個(gè)胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此為獲得多個(gè)遺傳性狀相同的個(gè)體，過(guò)程②需要采用胚胎移植技術(shù)．對(duì)囊胚進(jìn)行分割時(shí)，注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育；胚胎分割技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性．
（6）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）HindIII和BamHI 　　氨芐青霉素
（2）A　　　        
（3）C
（4）（動(dòng)物）血清      
（5）胚胎分割移植  內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割     全能
（6）C

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合乳腺生物反應(yīng)器培育過(guò)程圖和曲線圖，考查基因工程、胚胎工程、基因頻率的變化及生物進(jìn)化等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具和操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱或采用的技術(shù)；識(shí)記胚胎分割技術(shù)的理論基礎(chǔ)，能提取圖中有效信息答題．