Question

3．科技人員將人的干擾素基因?qū)�入大腸桿菌中并大規(guī)模培養(yǎng)，以提取干擾素用于制藥．回答下列問題：
（1）人的干擾素基因一般來自cDNA文庫，cDNA中沒有（填“有”或“沒有”）啟動子．獲得的目的基因可通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，進(jìn)行擴(kuò)增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物．
（2）為使干擾素基因在大腸桿菌中高效表達(dá)，應(yīng)將擴(kuò)增后的干擾素基因片段正確插入載體的啟動子和終止子之間，終止子的作用是使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止．
（3）檢測人的干擾素基因在大腸桿菌中是否轉(zhuǎn)錄，用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作為探針進(jìn)行檢測．

Answer 1

分析 1、PCR技術(shù)：
（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
（2）原理：DNA復(fù)制．
（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．
2、cDNA文庫和基因文庫的比較表：

文庫類型	cDNA	基因組文庫
文庫大小	小	大
基因中啟動子	無	有
基因中內(nèi)含子	無	有
基因多少	某種生物的部分基因	某種生物的全部基因
物種間的基因交流	可以	部分基因可以

解答 解：（1）與基因組文庫相比，cDNA中沒有啟動子．獲得的目的基因可通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，進(jìn)行擴(kuò)增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物．
（2）基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等，其中啟動子啟動基因的轉(zhuǎn)錄，終止子使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止，為使干擾素基因在大腸桿菌中高效表達(dá)，應(yīng)將擴(kuò)增后的干擾素基因片段正確插入載體的啟動子和終止子之間．
（3）檢測人的干擾素基因在大腸桿菌中是否轉(zhuǎn)錄，用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作為探針進(jìn)行檢測．
故答案為：
（1）沒有      PCR     要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物
（2）啟動子       使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止
（3）放射性同位素標(biāo)記的目的基因

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，識記PCR技術(shù)的原理和過程，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．