Question

12．我們日常吃的大米中鐵含量極低，科研人員通過基因工程等技術，培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉基因水稻，改良了稻米的營養(yǎng)品質．如圖為培育轉基因水稻過程示意圖，請回答：

（1）在上述工程中，鐵結合蛋白基因稱為目的基因，獲取該基因后常用PCR技術進行擴增．
（2）構建重組Ti質粒時，通常要用同種限制酶分別切割含目的基因的DNA片段和質粒．將重組Ti質粒轉入農桿菌時，可以用CaCl₂處理農桿菌，使重組Ti質粒易于導入．
（3）將含有重組Ti質粒的農桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時，通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得含有重組質粒的愈傷組織．

Answer 1

分析 基因工程的一般操作步驟有：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與表達．其中獲取的目的基因常用PCR技術進行擴增；基因工程的工具酶有限制酶和DNA連接酶，通常要用同一種限制酶分別切割質粒和含目的基因的DNA片段，然后再用DNA連接酶連接成重組質粒．在植物基因工程中，常利用植物的組織培養(yǎng)技術將植物受體細胞培養(yǎng)為完整植株，此過程中生長素和細胞分裂素的比例至關重要．

解答 解：（l）獲取目的基因的方法有三種：①從基因文庫中獲取，②利用PCR技術擴增，③人工合成（化學合成）．為了培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉基因水稻，所以鐵結合蛋白基因稱為目的基因，獲取該基因后常用PCR技術進行擴增．
（2）構建重組質粒的過程中，通常要用同一種限制酶分別切割質粒和含目的基因的DNA片段，使它們產生相同的黏性末端，然后再用DNA連接酶連接成重組質粒．將重組Ti質粒轉入農桿菌時，可以用CaCl₂溶液處理農桿菌，使農桿菌屬于感受態(tài)，便于重組Ti質粒導入．
（3）質粒上的標記基因為潮霉素抗性基因，因此通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得含有重組質粒的愈傷組織．
故答案為：
（1）目的基因　PCR
（2）含目的基因的DNA片段     質�！�CaCl₂
（3）含有重組質粒的愈傷組織

點評 本題考查基因工程中培育轉基因水稻的相關知識，意在考查學生理解的知識要點、獲取信息以及識圖分析能力和運用所學知識分析問題、解決問題的能力．