Question

2．大腸桿菌是一種兼性厭氧菌，在無(wú)氧條件下，發(fā)酵能將葡萄糖轉(zhuǎn)換成多種有機(jī)酸并生成二氧化碳，某研究機(jī)構(gòu)用“濾膜法”對(duì)受污染的河流水體進(jìn)行了大腸桿菌活菌數(shù)目的測(cè)定．
回答下列相關(guān)問(wèn)題：
（1）研究人員向葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)液中加入適量的溴麝香草酚藍(lán)水溶液后，裝入圖甲所示的試管中，再將污水水樣滴加進(jìn)去振蕩均勻，適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀察到溶液顏色的變化是由藍(lán)變綠再變黃．
（2）圖乙中濾膜的孔徑應(yīng)大于（“大于”、“小于”或“等于”）大腸桿菌．
（3）制備圖乙中牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時(shí)，培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法，待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板．
（4）為了鑒別大腸桿菌菌落，可向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)染料，該研究機(jī)構(gòu)通過(guò)統(tǒng)計(jì)黑色菌落色菌落的數(shù)目，計(jì)算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目．理論上他們的統(tǒng)計(jì)值要比實(shí)際值偏低，（“偏高”、“偏低”或“相等”） 理由是兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到1個(gè)菌落．

Answer 1

分析 1、二氧化碳可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃．
2、消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對(duì)象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

3、伊紅為酸性染料，美藍(lán)為堿性染料，大腸桿菌在含有伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上形成的菌落呈深紫色（黑色），并有金屬光澤，伊紅美藍(lán)是專一鑒別大腸桿菌的指示劑．
4、常用的純化微生物時(shí)的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法．
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）由題干“在無(wú)氧條件下，大腸桿菌通過(guò)發(fā)酵能將葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)槎喾N有機(jī)酸并產(chǎn)生CO₂等氣體”，向葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)液中加入適量的溴麝香草酚藍(lán)培養(yǎng)一段時(shí)間的大腸桿菌，可產(chǎn)生CO₂氣體，CO₂可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃．
（2）分析圖解可知，實(shí)驗(yàn)將待測(cè)水樣進(jìn)行過(guò)濾，得到的濾膜進(jìn)行微生物培養(yǎng)，因此水中的大腸桿菌應(yīng)留在濾膜上，即圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)小于大腸桿菌．
（3）培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板．
（4）伊紅美藍(lán)是專一鑒別大腸桿菌的指示劑，為了鑒別大腸桿菌菌落，可向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)作為指示劑．在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，可以鑒定出菌落為黑色的具有金屬光澤的大腸桿菌，因此該小組通過(guò)統(tǒng)計(jì)黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目．由于培養(yǎng)基中兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到1個(gè)菌落，因此理論上他們的統(tǒng)計(jì)值比實(shí)際值偏低．
故答案為：
（1）由藍(lán)變綠再變黃
（2）大于
（3）高壓蒸汽滅菌法      50
（4）伊紅美藍(lán)     黑色菌落    偏低     兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到1個(gè)菌落

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的培養(yǎng)、分離和計(jì)數(shù)的知識(shí)，考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn)，并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論是解題的關(guān)鍵．