Question

4．土壤中的纖維素分解菌能合成纖維素酶，通過(guò)對(duì)這些微生物的研究與應(yīng)用，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面料等．從土壤中分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)流程如下：土壤取樣→選擇培養(yǎng)基→梯度稀釋→鑒別培養(yǎng)基
（1）纖維素酶是復(fù)合酶，由C₁酶、C_x酶和葡萄糖苷酶組成．
（2）實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選常應(yīng)用選擇培養(yǎng)基的方法，原理是根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)．為分離得到纖維素分解菌，使用的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素作為主要碳源．
（3）梯度稀釋前進(jìn)行選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度，這一步一般選用液體（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基．
（4）梯度稀釋后用涂布器（儀器）將菌種接種在培養(yǎng)基表面．
（5）用剛果紅染色法鑒定纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上的菌落周?chē)鷷?huì)形成透明圈，其大小反映產(chǎn)生纖維素酶能力大小（或產(chǎn)生纖維素酶的多少）．

Answer 1

分析 分解纖維素的微生物的分離：
（1）實(shí)驗(yàn)原理：
①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶．纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)．
②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．
（2）實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
土壤取樣：采集土樣時(shí)，應(yīng)選擇富含纖維素的環(huán)境
↓
梯度稀釋：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度
↓
梯度稀釋
↓
涂布平板：將樣品涂布于含剛果紅的鑒別纖維素分解菌的固體培養(yǎng)基上
↓
挑選產(chǎn)生中心透明圈的菌落：產(chǎn)生纖維素酶的菌落周?chē)�出現(xiàn)透明圈，從產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落上挑取部分細(xì)菌，并接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在30～37℃條件下培養(yǎng)，可獲得較純的菌種．

解答 解：（1）纖維素酶是復(fù)合酶，由C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶組成．
（2）實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選常應(yīng)用選擇培養(yǎng)基的方法，原理是根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)．篩選纖維素分解菌應(yīng)先將從土壤中獲得的微生物，在以纖維素為唯一碳源的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇培養(yǎng)，選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度．
（3）梯度稀釋前進(jìn)行選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度，這一步一般選用液體培養(yǎng)基．
（4）梯度稀釋后用涂布器將菌種接種在培養(yǎng)基表面．
（5）用剛果紅染色法鑒定纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上的菌落周?chē)鷷?huì)形成透明圈，其大小反映 產(chǎn)生纖維素酶能力大�。ɑ虍a(chǎn)生纖維素酶的多少）
故答案為：
（1）葡萄糖苷酶
（2）根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)      纖維素
（3）增加纖維素分解菌的濃度、液體
（4）涂布器
（5）剛果紅、產(chǎn)生纖維素酶能力大�。ɑ虍a(chǎn)生纖維素酶的多少）

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記接種微生物常用的兩種方法；識(shí)記纖維素酶的組成；識(shí)記土壤中纖維素分解菌的篩選過(guò)程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．