Question

16．某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價（能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數），結果如圖所示．

若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細胞（染色體數目40條），并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞（染色體數目60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導細胞融合，經篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞．
回答下列問題：
（1）制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000以上，則小鼠最少需要經過四次免疫后才能有符合要求的．達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細胞的是Y小鼠．
（2）細胞融合實驗完成后，融合體系中含有多種類型細胞的原因是細胞融合不具有特異性，在誘導劑的作用下，相同種類和不同種類的細胞均可以融合．
（3）雜交瘤細胞中有1個細胞核，染色體數目最多是200條．（考慮分裂不同時期）
（4）未融合的B淋巴細胞經多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是①B淋巴細胞高度分化，不能惡性增殖；
②不可能渡過原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程中．

Answer 1

分析 據圖分析，在第四次沒有過程中出現了Y血清抗體均達到16000以上；在第五次中，Y的效價最大，最適合用于制備B淋巴細胞；B細胞與骨髓瘤細胞形成的雜交細胞有三種：B淋巴細胞自身融合的細胞，骨髓瘤細胞自身融合的細胞和雜交瘤細胞．融合形成的雜交瘤細胞，具有2個親本的染色體，故染色體為100條．

解答 解：（1）據圖分析，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價均達到16000以上，小鼠Y的B淋巴細胞產生抗體效價最高，最適用于制備單克隆抗體．
（2）由于細胞膜具有流動性，且誘導之后的細胞融合不具有特異性，故體系中會出現多種類型的細胞，融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外，還有骨髓瘤細胞和B淋巴細胞的自身融合產物．
（3）雜交瘤細胞形成后，由于核膜具有流動性，故小鼠的免疫B淋巴細胞核與其骨骼瘤細胞核會融合形成一個雜交的細胞核．小鼠的B淋巴細胞（染色體數目40條）和骨髓瘤細胞（染色體數目60條）融合后，染色體可達100條，在有絲分裂后期染色體數目臨時加倍為200條．
（4）未融合的B淋巴細胞經多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因可能是B淋巴細胞高度分化，不能惡性增殖；也可能是B淋巴細胞不可能渡過原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程中．
故答案為：
（1）四  Y   
（2）細胞融合不具有特異性，在誘導劑的作用下，相同種類和不同種類的細胞均可以融合
（3）1    200
（4）①B淋巴細胞高度分化，不能惡性增殖
②不可能渡過原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程中的兩次危機

點評 本題考查單克隆抗體制備的相關知識，意在考查學生的識圖和判斷能力，屬于中檔題．