Question

如圖是綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖同答：

（1）分析可知，科學(xué)家獲取綠色熒光蛋白基因所運(yùn)用的限制酶是圖中所示的

 

，最終獲得的綠色熒光蛋白基因的末端類型屬于

 

．
（2）圖示工程中，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞的過(guò)程③稱為

 

，常用的方法是

 

．
（3）圖示中，作為受體細(xì)胞的去核卵母細(xì)胞一般處在

 

期，常通過(guò)

 

（物理方法）進(jìn)行激活，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育進(jìn)程．
（4）培養(yǎng)圖示重組細(xì)胞時(shí)，將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類、數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為

 

培養(yǎng)基．通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量的

 

等天然成分．
（5）圖示重組細(xì)胞培養(yǎng)至一定階段可通過(guò)

 

方法，從而一次獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因豬．過(guò)程⑧的實(shí)質(zhì)是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程,胚胎分割移植

專題：

分析：1、胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術(shù)．來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一．
2、胚胎移植--是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)．胚胎移植簡(jiǎn)單概括為早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移．
3、受體細(xì)胞常選用去核卵（母）細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞大，容易操作；卵（母）細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富；含有促使細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)．

解答： 解：（1）圖中所示的限制酶PstI和EcoRⅠ可以切割DNA片段，獲取綠色熒光蛋白基因，并不能破壞目的基因．限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端不平整，即末端為黏性末端．
（2）轉(zhuǎn)化是指將目的基因進(jìn)人受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程．如圖示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞的過(guò)程．因受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞，常用的方法是顯微注射法．
（3）受體細(xì)胞常選用去核卵（母）細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞大，容易操作；卵（母）細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富；含有促使細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)．一般取處在MⅡ中（減數(shù)第二次分裂中）期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的，通過(guò)電脈沖（或電刺激）進(jìn)行激活，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育進(jìn)程．
（4）培養(yǎng)圖示重組細(xì)胞時(shí)，將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類、數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為合成培養(yǎng)基．動(dòng)物細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量的血清（或血漿）等天然成分．
（5）胚胎分割采用機(jī)械方法將早期胚胎切割，經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚，從而獲得較多基因型相同的轉(zhuǎn)基因豬．圖示重組細(xì)胞培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚，可通過(guò)胚胎分割、胚胎移植方法，從而一次獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因豬．過(guò)程⑧是胚胎移植過(guò)程，其實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移．
故答案為：
（1）PstⅠ和EcoRⅠ黏性末端
（2）轉(zhuǎn)化                        顯微注射法
（3）MⅡ中（減數(shù)第二次分裂中）     電脈沖（或電刺激）
（4）合成                        血清（或血漿）
（5）胚胎分割、胚胎移植     早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移

點(diǎn)評(píng)：本題著重考查了基因工程、胚胎工程等方面的知識(shí)，意在考查考生能識(shí)記并理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成一定知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力．