13．基因工程發(fā)展迅猛，進(jìn)入二十一世紀(jì)的第二個(gè)十年，新的技術(shù)不斷提出、發(fā)展，如鋅指核酸酶、TALEN技術(shù)、CRISPR/Cas9技術(shù)等．2015年末，英國(guó)醫(yī)生用基于TALEN技術(shù)的基因療法，成功治愈了小女孩萊拉（Layla）的白血�。�2016年3月11日，科學(xué)家宣布用CRISPR方法根除了已整合到人體細(xì)胞染色體上的HIV病毒．回答下列問題：
（1）基因工程實(shí)現(xiàn)了定向改造生物性狀；基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建；獲得目的基因的方法有：基因文庫(kù)法、PCR法和人工合成法．進(jìn)行PCR時(shí)，加入反應(yīng)體系的引物決定了目的DNA被擴(kuò)增的片段．
（2）現(xiàn)代基因工程有關(guān)人類疾病、發(fā)育的研究，主要實(shí)驗(yàn)材料是誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS cells）．實(shí)驗(yàn)室大量培養(yǎng)iPS細(xì)胞所需的條件有：無菌無毒的環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)、溫度和PH、氣體環(huán)境．iPS細(xì)胞是用體細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)成為具有分裂、分化能力，類似胚胎干細(xì)胞的一類細(xì)胞．相比于直接使用胚胎干細(xì)胞，iPS細(xì)胞的使用避免了倫理\道德\法律等問題．

12．（1）生態(tài)系統(tǒng)中被稱為“基石”的成分是：生產(chǎn)者，原因是進(jìn)行光合作用制造有機(jī)物．
（2）光合作用需要色素參加的過程發(fā)生在葉綠體中類囊體薄膜上，色素的作用是吸收光能，此過程叫光反應(yīng)．
（3）層析法分離光合作用色素的試驗(yàn)中，四種色素在濾紙條上分離的原理是：不同色素在層析液中溶解度不同\不同色素隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散速度不同．分離的結(jié)果，濾紙條最上端的色素是胡蘿卜素，最下端的色素是葉綠素b．
（4）圖2是某植物光合作用強(qiáng)度受光照強(qiáng)度影響情況．圖1是該植物葉肉細(xì)胞示意圖．當(dāng)植物處于圖2b點(diǎn)對(duì)應(yīng)的光強(qiáng)下時(shí)，在圖1中使用箭頭標(biāo)出CO₂和O₂的運(yùn)動(dòng)情況．

11．3月警方披露了“毒疫苗”案，造成了不少家長(zhǎng)的恐慌．有關(guān)疫苗的敘述不正確的是（　�。�

	A．	疫苗需要冷藏的原因是疫苗是有活性的減毒病原體或病原體的特異蛋白
	B．	疫苗的原理是接種后使人體產(chǎn)生相應(yīng)的記憶細(xì)胞和抗體
	C．	正確接種有效疫苗后，就能100%預(yù)防此種疫苗對(duì)應(yīng)疾病
	D．	免疫能力低下的人應(yīng)謹(jǐn)慎接種疫苗是因?yàn)橐呙鐚儆诳乖?/td>

10．東非三大湖：維多利亞湖、馬拉維湖、坦葛尼喀湖中各自生活著300到500種麗魚，不同湖中有些種類非常相似，比如都有刮食水底巖石上水藻的種類，都有吸食水面昆蟲的種類等．但科學(xué)家通過DNA分析發(fā)現(xiàn)，維多利亞湖中不同麗魚相互之間的親緣關(guān)系，遠(yuǎn)遠(yuǎn)近于維多利亞湖和另外兩個(gè)湖中形態(tài)結(jié)構(gòu)類似的麗魚之間的親緣關(guān)系．馬拉維湖和坦葛尼喀湖中的麗魚也有同樣的現(xiàn)象．另外，古氣候?qū)W證明，在12000年前，三大湖都曾經(jīng)瀕臨干涸．下列說法正確的是（　　）

	A．	維多利亞湖中不同麗魚之間一定存在生殖隔離
	B．	維多利亞湖中的麗魚證實(shí)了長(zhǎng)期的地理隔離可能導(dǎo)致新物種的產(chǎn)生
	C．	12000年至今，可能由于洪水等原因?qū)е蔓愻~在三大湖之間遷移，從而增加了今天三大湖中的麗魚種類
	D．	維多利亞湖、馬拉維湖、坦葛尼喀湖中形態(tài)結(jié)構(gòu)類似的麗魚之間，一定不存在生殖隔離

9．鋅指核酸酶（zincfinger nucleases，ZFNs）是科學(xué)家為特異性切割DNA構(gòu)建的工具，由一個(gè)DNA識(shí)別域和一個(gè)DNA剪切域構(gòu)成．DNA識(shí)別域含一到三個(gè)鋅指蛋白，每個(gè)鋅指蛋白可以結(jié)合一個(gè)DNA上的堿基三聯(lián)體，如GAC，ATA等，幾個(gè)鋅指蛋白串聯(lián)，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)特異DNA序列的識(shí)別；兩個(gè)DNA剪切域臨近時(shí)可以產(chǎn)生核酸內(nèi)切酶活性，將接觸的DNA切割開．有關(guān)ZFNs的下列敘述錯(cuò)誤的是（　�。�

	A．	ZFNs識(shí)別特定DNA序列的原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)
	B．	ZFNs可以使雙縮脲試劑出現(xiàn)紫色反應(yīng)
	C．	ZFNs對(duì)DNA的特異性切割由鋅指蛋白定位
	D．	ZFNs主要用于基因工程中的“基因剪刀”

8．用狗做實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，食物尚未進(jìn)入胃內(nèi)甚至沒有食物就可引起胃液分泌，稱為頭期胃液分泌．該過程受神經(jīng)調(diào)節(jié)和神經(jīng)-體液調(diào)節(jié)的共同調(diào)控，如圖所示．下列說法不正確的是（　�。�

	A．	頭期胃液分泌的反射中樞不可能是大腦皮層
	B．	胃泌素由胃竇G細(xì)胞分泌，通過體液運(yùn)輸，且調(diào)節(jié)生命活動(dòng)，可能是一種激素
	C．	在頭期胃液分泌中，胃竇G細(xì)胞和胃腺細(xì)胞都是效應(yīng)器
	D．	頭期胃液分泌的調(diào)控說明神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)相互協(xié)調(diào)，共同作用

7．關(guān)于人體內(nèi)的信息傳遞、交流過程，敘述不正確的是（　　）

	A．	細(xì)胞間的信息交流不一定依賴信息分子
	B．	激素、神經(jīng)遞質(zhì)、淋巴因子等都是信息分子，血液中的葡萄糖也是一種信息分子
	C．	信息分子完成信息交流功能都要依賴相應(yīng)靶細(xì)胞膜上的特異性受體
	D．	不同細(xì)胞表面的信息分子受體不同，是不同細(xì)胞膜膜蛋白種類和數(shù)量不同的原因之一

6．下列敘述正確的是（　�。�

	A．	用32P 標(biāo)記進(jìn)行噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)，攪拌、離心過早會(huì)使上清液放射性偏高，過晚則使上清液放射性偏低
	B．	細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)是DNA，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)是RNA
	C．	摩爾根根據(jù)果蠅雜交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果提出了基因在染色體上的假說
	D．	在DNA分子中，脫氧核糖數(shù)：磷酸基數(shù)：堿基數(shù)=1：1：1

5．人類鐮刀型細(xì)胞貧血癥是一種單基因遺傳病，患者的血紅蛋白多肽鏈中，一個(gè)谷氨酸被纈氨酸替換．導(dǎo)致功能異常，回答下列問題：
（1）患者產(chǎn)生異常血紅蛋白的氨基酸序列改變的根本原因是基因中脫氧核苷酸（或堿基）序列改變．
（2）用基因工程方法制備血紅蛋白時(shí)，可用早期紅細(xì)胞的mRNA琢磨吧，在逆轉(zhuǎn)錄酶酶的作用下產(chǎn)生的cDNA片段，利用PCR進(jìn)行擴(kuò)增，進(jìn)行了20個(gè)循環(huán)后，理論上可以產(chǎn)生2²⁰個(gè)DNA分子，該雙鏈與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，這個(gè)受體菌群叫做cDNA文庫(kù)（或部分基因文庫(kù)），獲得的cDNA與早期紅細(xì)胞中該基因堿基序列不同（填“相同”或“不同”）
（3）將正常血紅蛋白基因?qū)�入患者骨髓造血干�?xì)胞中，可以合成正常的血紅蛋白達(dá)到治療目的．此操作不屬于（填“屬于”或“不屬于”）蛋白質(zhì)工程，因?yàn)槲锤淖兊鞍踪|(zhì)結(jié)構(gòu)．
（4）檢測(cè)目的基因是否表達(dá)出血紅蛋白，可從受體菌中提取蛋白質(zhì)，進(jìn)行抗原-抗體雜交技術(shù)來檢測(cè)，若出現(xiàn)雜交帶，則表明該受體已合成血紅蛋白．

4．1982年，利用現(xiàn)代生物科技，人們研究出了世界上第一例體型比普通小鼠大1.8倍的轉(zhuǎn)基因“超級(jí)小鼠”．請(qǐng)根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問題：
（1）質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下：

為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，開可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的末端相同．
（2）按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即T₄DNA連接酶和E•coliDNA連接酶．基因工程中除質(zhì)粒外，動(dòng)植物病毒和λ噬菌體衍生物也可作為運(yùn)載體．
（3）實(shí)施基因工程的核心是構(gòu)建基因表達(dá)載體．
（4）圖1、2箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)．請(qǐng)回答：

用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因，構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在其目的基因前要加上特殊的啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，圖中抗生素抗性基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．
（5）將目的基因?qū)�入小鼠�?xì)胞時(shí)常采用顯微注射技術(shù)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入到受體細(xì)胞．