6．下列各種生理現(xiàn)象中，沒有直接涉及到細胞間信息交流的是（　�。�

	A．	精子與卵細胞的結(jié)合		B．	肝細胞表面的糖蛋白結(jié)合胰島素
	C．	興奮在神經(jīng)元之間傳遞		D．	水分子進入細胞

5．回答有關(guān)胚胎工程的問題：
（1）為了獲得足夠數(shù)量的卵細胞，先利用促性腺激素刺激供體雌性鼠超數(shù)排卵，然后從輸卵管沖取，獲取的精子也要進行獲能處理，在獲能液或?qū)Ｓ檬芤褐型瓿审w外受精．
（2）早期胚胎在發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)，當胚胎培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段時，可進行胚胎移植．通過胚胎分割技術(shù)可獲得遺傳物質(zhì)相同的兩個胚胎，但要將囊胚階段的內(nèi)細胞團均等分割．若要鑒定胚胎的性別，可獲取滋養(yǎng)層細胞進行做鑒定．
（3）在胚胎移植前要對接受胚胎的受體進行同期發(fā)情處理．
（4）胚胎干細胞形態(tài)上具有體積小，細胞核大，核仁明顯的特性，它在添加抑制因子的培養(yǎng)液中可以維持不分化的狀態(tài)．

4．圖是制備分泌抗X抗體的過程，根據(jù)圖解回答問題：

（1）給小鼠注射抗原的目的是產(chǎn)生相應的B淋巴細胞．
（2）在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細胞和骨髓瘤細胞，是因為它們?nèi)诤虾蟮碾s交瘤細胞具有體外無限增殖和分泌特異性抗體的特性．
（3）由圖中可看出，單克隆抗體制備過程運用了動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)的細胞工程技術(shù)，③特有的促融方法是滅活病毒．
（4）圖中有兩次篩選過程，步驟⑤⑥的目的是篩選出能產(chǎn)生特定抗體的細胞，后者篩選的原理是抗原-抗體雜交．
（5）單克隆抗體最重要的用途是制成生物導彈，可在原位殺死癌細胞．

3．下面是一項“利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)人胰島素的方法”的專利摘要，請回答：
本發(fā)明利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應器生產(chǎn)人胰島素．所用的人胰島素基因是依據(jù)植物偏愛密碼子的原則來設(shè)計所含的密碼子，通過人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列，避免胰島素在植物細胞中的降解．將該基因置于CaMV 35S啟動子和果實專一性啟動子2A12的驅(qū)動之下通過農(nóng)桿菌介導的方法轉(zhuǎn)入番茄中，在番茄的果實中表達人胰島素．
（1）此基因工程中的目的基因是人胰島素基因，將人工合成的DNA片段拼接在一起，所需要的酶是DNA連接酶，T₄-DNA連接酶還可以連接平末端．
（2）要想在體外獲得大量該目的基因的片段，可以采用PCR擴增技術(shù)（用字母）．
（3）試分析在C端加上KDEL的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列，為什么可以避免胰島素在植物細胞中的降解？使胰島素合成后在植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中保存，以免在細胞內(nèi)被降解．
（4）用目的基因與農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒結(jié)合構(gòu)建表達載體，該表達載體的組成中不應含有的是④⑦（從下列選項中選擇）．
①目的基因   ②CaMV 35S啟動子  ③果實專一性啟動子2A12   ④RNA引物
⑤標記基因   ⑥T-DNA            ⑦RNA聚合酶基因片段      ⑧終止子
（5）若培育轉(zhuǎn)基因動物，用顯微注射法，將目的基因?qū)�入受精卵中．要確定目的基因是否整合到染色體上，一般需用放射性同位素標記（或熒光分子標記）的目的基因（單鏈）做探針，與轉(zhuǎn)基因小鼠細胞中提取的核DNA進行分子雜交．

2．下面是以小鼠為對象進行的研究，請回答問題：
（1）在小鼠細胞培養(yǎng)過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制．要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用胰蛋白酶處理．動物細胞培養(yǎng)液的成分通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素等，與植物細胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有動物血清、血漿．為了防止污染，通常還要在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，并且一般需將細胞置于含95%的空氣加5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，其作用是維持培養(yǎng)液的PH，
（2）為使外源基因在后代中長期保持，可將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞的細胞核轉(zhuǎn)入去核的卵細胞中構(gòu)成重組細胞，使其發(fā)育成與供體具有相同性狀的個體．
（3）在細胞培養(yǎng)過程中，通常在冷凍（或超低溫、液氮）條件下保存細胞，因為在這種條件下，細胞中酶的活性降低，細胞的代謝速率降低．

1．如圖為牛胚胎移植的基本程序，請據(jù)圖回答：

（1）圖中a、b、c過程分別是指超數(shù)排卵處理、胚胎的收集（沖卵）、胚胎移植．
（2）供體母牛的主要職能是能產(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎；受體母牛必須具備的條件是健康的體質(zhì)和健康的繁殖能力．
（3）生物技術(shù)包含的內(nèi)容很豐富，生物技術(shù)的應用帶給人類很多福音，但也存在著安全性和倫理方面的爭議．關(guān)于克隆技術(shù)在人類中的應用，我國政府的觀點是禁止生殖性克隆不反對治療性克�。�

20．新疆是我國重要的畜牧業(yè)省區(qū)之一，但當?shù)匮虻漠a(chǎn)肉率和產(chǎn)量遠遠不能滿足市場的需求，每年都要從青海等省份調(diào)進大批羊肉．自2009年9月開始，新疆啟動了優(yōu)質(zhì)種羊萬枚胚胎移植工程，有4 000多只新疆本地肉用羊“懷上”并最終產(chǎn)下品質(zhì)優(yōu)良的“后代”．胚胎移植的基本程序如圖，請據(jù)圖回答：

（1）從受精卵→胚胎→幼羊的過程體現(xiàn)了受精卵具有全能性．
（2）選擇供體母羊、供體公羊的要求是具有優(yōu)良遺傳性狀的同種羊．對供體母羊進行超數(shù)排卵時應注射促性腺激素．
（3）判斷是否受精的標志是卵黃膜和透明帶間隙是否出現(xiàn)兩個極體．
（4）胚胎分割時，一般采用發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚．在對囊胚階段的胚胎進行分割時，要特別注意將內(nèi)細胞團均等分割，否則會影響分割后的胚胎恢復和進一步發(fā)育．直接移植給受體母羊多個胚胎，產(chǎn)生的多個后代的基因型相同嗎？不一定；通過胚胎分割產(chǎn)生的兩個或多個個體有（填“有”或“沒有”）相同的遺傳物質(zhì)．

19．人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大，通常從人血中提�。�但由于艾滋病病毒（HIV）等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對血 液制品顧慮重重．如果應用基因工程和克隆技術(shù)，將人的血清白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細胞中，那么利用牛的乳汁生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能．其大致過程如下：
Ⅰ．采集良種供體奶牛的卵母細胞和精液，通過體外受精，形成奶牛受精卵；
Ⅱ．將人血清白蛋白基因?qū)�入奶牛受精卵，形成重組細胞；
Ⅲ．電脈沖刺激重組細胞促使其形成早期胚胎；
Ⅳ．將胚胎移植到受體母牛的子宮中，最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛．
請回答下列問題：
（1）步驟Ⅰ中，在體外受精前，需要對奶牛的精子進行獲能處理．受精時，往往一個卵母細胞只能和一個精子結(jié)合，受精過程中防止多精入卵的生理反應包括透明帶反應和卵黃膜封閉作用
（2）實驗步驟Ⅲ中，進行動物早期胚胎的體外培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中除了含有各種無機鹽和有機鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加激素和動物血清．
（3）實驗步驟Ⅳ中，在胚胎移植前可以取囊胚的滋養(yǎng)層細胞 做DNA分析鑒定性別，應選擇性別為雌性的奶牛胚胎進行移植．
（4）若需迅速得到大量轉(zhuǎn)基因奶牛，現(xiàn)有兩種處理方法：
方法A：在步驟Ⅳ中將早期胚胎分離成若干個胚胎細胞，讓其分別發(fā)育成一頭小牛．進行上述操作時，應選擇發(fā)育良好形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚進行操作．
方法B：在步驟Ⅳ中將早期胚胎細胞的細胞核移植到普通黃牛的去核卵細胞細胞中，使其重組并發(fā)育成新胚胎．為獲得大量可供移植的胚胎細胞核，可將早期胚胎細胞分離出來，在添加抑制因子培養(yǎng)液中，將其培養(yǎng)成能夠增殖而不發(fā)生分化的胚胎干細胞，再從該細胞中提取所需的細胞核．上述兩種方法中，最能保持步驟Ⅳ中早期胚胎細胞遺傳特征的是方法A．

18．利用轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺生物反應器生產(chǎn)人的生長激素，需要構(gòu)建一種能高水平表達的基因表達載體，選擇合適的基因啟動子至關(guān)重要．由于無法由基因表達產(chǎn)物推知啟動子的堿基序列，運用PCR技術(shù)單獨克隆啟動子存在困難．科研人員經(jīng)過長期研究，終于發(fā)明了如圖所示的一種克隆啟動子的方法．請分析回答：

（1）培育轉(zhuǎn)基因奶牛時，需要在生長激素基因編碼序列前插入乳腺蛋白基因的啟動子；構(gòu)建的基因表達載體導入動物受精卵常用顯微注射技術(shù)．
（2）由基因表達產(chǎn)物無法推知啟動子堿基序列，其原因是基因中啟動子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄．
（3）過程①需選擇的限制酶是BamHⅠ，過程③需選擇的限制酶是HindⅢ．過程④需要使用的工具酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
（4）過程④中可以根據(jù)編碼序列兩端的部分堿基序列設(shè)計引物進行擴增．運用PCR擴增DNA片段的原理是DNA雙鏈復制．

17．基因工程又叫做基因拼接技術(shù)．該技術(shù)能夠通過對生物的基因進行改造和重新組合，產(chǎn)生出人類所需要的基因產(chǎn)物．自20世紀70年代基因工程發(fā)展起來以后，人們開始采用高新技術(shù)生產(chǎn)各種基因產(chǎn)品．下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1和圖2示基因工程部分操作過程：

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	EcoRⅠ	SmaⅠ
識別序列及切割位點	G↓GATCC CCTAG↑G	A↓AGCTT TTCGA↑A	G↓AATTC CTTAA↑G	CCC↓GGG GGG↑CCC

（1）從表中四種酶的酶切割位點看，可以切出平末端的酶是SmaⅠ．
（2）將目的基因與質(zhì)粒DNA縫合時，兩條鏈上的磷酸、脫氧核糖在DNA連接酶的作用下連接起來，形成磷酸二酯鍵；兩條鏈間的堿基對通過氫鍵連接起來．
（3）圖2中的質(zhì)粒分子可被表中EcoRⅠ酶切割，切割后，質(zhì)粒含有2個游離的磷酸基團．
（4）若對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高．
（5）在相關(guān)酶的作用下，甲與乙能否拼接起來？并說明理由．能，二者具有相同的黏性末端．