①卵母細(xì)胞的收集和體外培養(yǎng)：從屠宰場(chǎng)水牛的卵巢中收集并處理卵母細(xì)胞，隨機(jī)分成5組，分別置于不同濃度亞麻酸的培養(yǎng)液中，在39℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)22～24h。

②卵母細(xì)胞成熟判斷：在顯微鏡下觀察卵母細(xì)胞，判斷其是否成熟，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表1。

③體外受精：在受精溶液中進(jìn)行體外受精后，用顯微鏡觀察判斷是否完成受精。

④早期胚胎培養(yǎng)：將受精卵移入胚胎培養(yǎng)液中培養(yǎng)44～48h后檢查分裂情況，每隔48h 更換一次培養(yǎng)液，第5～9天觀察囊胚發(fā)育情況，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表2。

（1）步驟①中，細(xì)胞培養(yǎng)箱中加5% CO2 的作用是_________________。

（2）步驟②中，成熟卵母細(xì)胞內(nèi)染色體的行為特征是_____________________________，步驟③中，判斷是否受精的依據(jù)是在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可否觀察到_____________。

（3）步驟④中，受精卵經(jīng)過(guò)卵裂期、________（時(shí)期）發(fā)育成囊胚，培養(yǎng)過(guò)程定期更換培養(yǎng)液的目的是_______________________、__________________________。

（4）根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，亞麻酸溶液為200μmol·L-1 時(shí)，對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育起________作用。

（5）本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，______________μmol·L-1的亞麻酸對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育都較有利，其判斷依據(jù)是__________________________________________________。

（1）將鼠細(xì)胞和人細(xì)胞在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，用_____處理，獲取實(shí)驗(yàn)用的單細(xì)胞懸液。

（2）將兩種細(xì)胞在37℃下混合培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中加入_______誘導(dǎo)融合，形成融合細(xì)胞，一般兩兩融合的細(xì)胞有____種。

（3）細(xì)胞膜的主要成分是______和蛋白質(zhì)。將連接了熒光染料的抗體與融合細(xì)胞在一定條件下培養(yǎng)，抗體與融合細(xì)胞的膜蛋白(抗原)特異性結(jié)合，其目的是標(biāo)記膜蛋白，以便于顯微鏡觀察。用熒光顯微鏡觀察融合細(xì)胞表面熒光的顏色和____，開(kāi)始時(shí)，鼠的細(xì)胞為綠色，人的細(xì)胞為紅色，兩種顏色不混合；一段時(shí)間后，可觀察到紅綠熒光交替分布的“嵌合體”。統(tǒng)計(jì)______，結(jié)果如下圖所示。

（4）科學(xué)家據(jù)此提出兩種假說(shuō)解釋嵌合體的形成。

假說(shuō)一：融合細(xì)胞合成了新的膜蛋白；

假說(shuō)二：原有膜蛋白在細(xì)胞膜平面上運(yùn)動(dòng)。

①使用_______抑制劑和ATP合成抑制劑分別處理融合細(xì)胞，均對(duì)嵌合體形成沒(méi)有顯著影響，這個(gè)結(jié)果否定了假說(shuō)一。

②在15℃、20℃、26℃的培養(yǎng)溫度下重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)，這些實(shí)驗(yàn)的結(jié)果為________，為假說(shuō)二提供了證據(jù)支持。

【題目】數(shù)量性狀通常顯示出一系列連續(xù)的表現(xiàn)型�，F(xiàn)有控制某高等植物植株高度的兩對(duì)等位基因A、a和B、b（已知這兩對(duì)基因位于一對(duì)同源染色體上），以累加效應(yīng)決定植株高度，且每個(gè)顯性基因的遺傳效應(yīng)是相同的。純合子AABB高50cm，aabb高30cm。這兩個(gè)純合子雜交得到，產(chǎn)生四種配子的比例為3：3：2：2。自交得到，在中，表現(xiàn)40cm高度的個(gè)體所占比例為

A.37.5%B.34%C.26%D.8%

（1）以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體，在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原理是________________________。

（2）若想培育一株新品種，既有此植物的性狀還有其他植物的性狀，理論上可以采用______________技術(shù)，細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出新的____________，該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是_______________________________。

（3）圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是_________________，A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)__________形成的。

（4）若該種植物是一種雜合體的名貴花卉，要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉，可用組織培養(yǎng)方法繁殖，在培養(yǎng)時(shí)，___________（填“能”或“不能”）采用花藥離體培養(yǎng)，原因是__________________________________________________。

注：Ampr/Kmr分別為氨芐青霉素/卡那霉素抗性基因。origin為復(fù)制原點(diǎn)，其余為限制酶酶切位點(diǎn)。

（1）對(duì)雙子葉植物進(jìn)行基因工程改造最常用的方法是____________，還需結(jié)合__________技術(shù)才能獲得新性狀的植株。

（2）中間載體通常用______________法導(dǎo)入微生物中擴(kuò)增，含有中間載體②PrbcS*T的微生物________（“能”或“不能”）在含有卡那霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，________（“能”或“不能”）在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。

（3）經(jīng)酶切后凝膠電泳，測(cè)得2B片段為0.4kb，經(jīng)圖示信息分析，Prbcs*T的長(zhǎng)度約為____________________。據(jù)圖分析，中間載體②2B形成中間載體②PrbcS*T，需要使用限制酶_________________切割。

（4）在T基因前“點(diǎn)突變引入NcoⅠ”酶切位點(diǎn)的方法是：設(shè)計(jì)包含_________識(shí)別序列的引物，然后用PCR技術(shù)擴(kuò)增。

A. 改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型對(duì)發(fā)酵的影響

B. 果酒發(fā)酵中期通入氮?dú)猓�酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)氧呼吸

C. 果醋的發(fā)酵周期與實(shí)驗(yàn)設(shè)定的溫度密切相關(guān)

D. 氣體入口與氣體出口可以交換使用

材料與用具：小鼠肺癌細(xì)胞懸浮液、物質(zhì)X、癌細(xì)胞培養(yǎng)液、生理鹽水、蒸餾水、活細(xì)胞檢測(cè)儀、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等（說(shuō)明：對(duì)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程和檢測(cè)方法不做具體要求）

（1）肺癌細(xì)胞是由正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)，除保留了原來(lái)細(xì)胞的某些特點(diǎn)外，其中最重要的特征是能無(wú)限增殖和細(xì)胞表面________減少。

（2）實(shí)驗(yàn)思路：

①取五個(gè)大小相同的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，編號(hào)為A、B、C、D、E，每組加入等量的肺癌細(xì)胞懸浮液和_____________，并測(cè)定初始細(xì)胞數(shù)。

②在B～E組中依次加入_________________不同濃度的物質(zhì)X（濃度分別為1．0μg/mL、2．0μg/mL、3．0μg/mL、4．0μg/mL），A組則加入___________作為對(duì)照；每組設(shè)置三個(gè)重復(fù)樣品。

③以上各組均置于______________。

④檢測(cè)與數(shù)據(jù)處理：分別在24h、48h、72h時(shí)取樣檢測(cè)各組存活的細(xì)胞數(shù)，取____值，求細(xì)胞存活率（細(xì)胞存活率=實(shí)驗(yàn)組／對(duì)照組×100％）。

（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下圖∶

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論______________________。

A. 作為受體大腸桿菌應(yīng)不含氨芐青霉素抗性基因，以便于篩選

B. 若大腸桿菌的菌落為藍(lán)色，則質(zhì)粒未導(dǎo)入大腸桿菌

C. 選擇培養(yǎng)基中除必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入適量氨芐青霉素

D. 應(yīng)選擇白色菌落的大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)

A.蛙的紅細(xì)胞B.霍亂弧菌C.HIN1病毒D.皮膚癌細(xì)胞

A. 過(guò)程①選擇胚胎干細(xì)胞作受體細(xì)胞是因?yàn)槠渚哂邪l(fā)育全能性

B. 過(guò)程②中必須通過(guò)一定方法篩選含有目的基因的胚胎干細(xì)胞

C. 過(guò)程③中導(dǎo)入囊胚的細(xì)胞數(shù)不同，子代小鼠的性狀一定相同

D. 過(guò)程④中為提高成功率，需對(duì)代孕母鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理