4．(09全國卷Ⅰ)下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交或植物細(xì)胞質(zhì)遺傳的敘述，錯誤的是

A．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可克服生殖隔離的限制，培育遠(yuǎn)緣雜種

B．不同種植物原生質(zhì)體融合的過程屬于植物體細(xì)胞雜交過程

C．兩個不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F₁的表現(xiàn)型一致

D．兩個不同品種的紫茉莉雜交，F(xiàn)₁的遺傳物質(zhì)來自母本的多于來自父本的

答案：C

解析：植物體細(xì)胞雜交可以用兩種不同的植物細(xì)胞，從而可克服生殖隔離的限制，植物體細(xì)胞雜交的過程，實際上是不同植物體細(xì)胞的原生質(zhì)體融合的過程。紫茉莉枝葉的性狀的遺傳是細(xì)胞質(zhì)遺傳，兩個不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F₁的表現(xiàn)型應(yīng)與母本一致，F(xiàn)₁的遺傳物質(zhì)來自母本的多于來自父本的，因為受精卵中的細(xì)胞質(zhì)幾乎全部來自母本。故C錯誤。

37.(09上海卷)(9分)人體細(xì)胞內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生的P⁵³基因，生物技術(shù)可對此類基因的變化進(jìn)行檢測。

(1)目的基因的獲取方法通常包括________和________。

(2)上圖表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的P⁵³基因的部分區(qū)域。與正常人相比，患者在該區(qū)域的堿基會發(fā)生改變，在上圖中用方框圈出發(fā)生改編的堿基對，這種變異被稱為________。

(3)已知限制酶E識別序列為CCGG,若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的P⁵³基因部分區(qū)域(見上圖)，那么正常人的會被切成________個片段，而患者的則被切割成長度為________對堿基和________對堿基的兩種片段。

(4)如果某人的P⁵³基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后，共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對的四種片段，那么該人的基因型是________(以P⁺表示正�；�因，Pⁿ表示異�；�因)。

答案：

(1)從細(xì)胞中分離　　 通過化學(xué)方法人工合成

(2)見下圖

　　　 基因堿基對的替換(基因突變)

(3)3　　　 460　　　 220

(4)

解析：本題主要考查基因工程相關(guān)知識。

(1)目的基因的獲取方法有直接分離和化學(xué)方法人工合成兩種；

(2)仔細(xì)對比正常人與患者的基因序列可知是CG堿基對變?yōu)榱薚A堿基對，這種變化屬于基因突變；

(3)正常人P⁵³基因終于兩個限制酶E的識別序列，完全切割后可產(chǎn)生三個片段，患者P⁵³基因中有一個限制酶E的識別序列發(fā)生突變，且突變點位于識別位點內(nèi)，這樣患者就只有一個限制酶E的識別序列，切割后產(chǎn)生兩個片段，分別為290+170=460對堿基，220對堿基；

(4)正常人經(jīng)限制酶E完全切割后產(chǎn)生三個片段，290對堿基、170對堿基和220對堿基，患者產(chǎn)生兩個片段460對堿基和220對堿基，則該人的基因型應(yīng)為P⁺P^-。

細(xì)胞工程

34．(09江蘇卷)(7分)蘇云金桿菌(Bt)能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖(為抗氨芐青霉素基因)，據(jù)圖回答下列問題。

(1)將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應(yīng)管中有　　　　　 種DNA片段。

(2)圖中②表示 HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得　　　 種重組質(zhì)粒；如果換用Bst l與BamHⅠ酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得　　　　　 種重組質(zhì)粒。　　

(3)目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的　　　　　　　 。

(4)圖中③的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白，可以協(xié)助帶有目的基因的T-DNA導(dǎo)人植物細(xì)胞，并防止植物細(xì)胞中　　　　　　 對T-DNA的降解。

(5)已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風(fēng)險相對較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞　　　　　　　　　　　　　　 。　

(6)生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的

　　　　　　　　 基因頻率的增長速率。

答案：

(1)4　　　

(2)2 　1　　

(3)復(fù)制　　

(4)DNA水解酶

(5)表面無相應(yīng)的特異性受體

(6)抗性

解析：本題考查基因工程的相關(guān)知識。(1)由于上述兩種酶形成的末端不一樣，所以被兩種不同的限制酶切割之后所形成的片段有AA、AB、BA、BB四種切法形成的四種片段。(A表示HindⅢ，B表示BamHⅠ)(2)同時被兩種限制酶切割有兩種不同的目的基因，即AB和BA，所以重組質(zhì)粒有兩種。Bst l與BamHⅠ酶切割的末端一樣，所以同時用這兩種限制酶切割只能形成一種目的基因，所以只能形成一種重組質(zhì)粒。(3)質(zhì)粒要進(jìn)行復(fù)制才能更多的表達(dá)出產(chǎn)物，所以重組之后要能復(fù)制。(4)酶具有專一性，對T-DNA的降解酶為DNA水解酶。(5)生物的細(xì)胞表面的受體具有特異性，人類腸上皮細(xì)胞沒有昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體。所以該毒素蛋白對人類的風(fēng)險相對較小(6)自然選擇是普遍存在的，純種種植自然選擇會使害蟲抗性基因頻率快速增長。所以混合種植降低害蟲的抗性基因頻率的增長速率。

31.(09重慶卷)(16分)小鼠基因敲除技術(shù)獲得2007年諾貝爾獎，該技術(shù)采用基因工程、細(xì)胞工程、雜交等手段使小鼠體內(nèi)的某一基因失去功能，以研究基因在生物個體發(fā)育和病理過程中的作用。例如現(xiàn)有基因型為BB的小鼠，要敲除基因B，可先用體外合成的突變基因b取代正�；�因B，使BB細(xì)胞改變?yōu)锽b細(xì)胞，最終培育成為基因敲除小鼠。

(1)基因敲除過程中外源基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可利用重組質(zhì)粒上的　　　　　　 檢測。如果被敲除的是小鼠抑癌基因，則可能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的　　　　　　　　 被激活，使小鼠細(xì)胞發(fā)生癌變。

(2)通過基因敲除，得到一只AABb小鼠。假設(shè)棕毛基因A、白毛基因a、褐齒基因B和黃齒基因b均位于常染色體上，現(xiàn)要得到白毛黃齒新類型小鼠，用來與AABb小鼠雜交的純合親本的基因型是　　　　　　 ，雜交子代的基因型是　　　　 。讓F₁代中雙雜合基因型的雌雄小鼠相互交配，子代中帶有b基因個體的概率是　　　　　　　　　　　 。不帶B基因個體的概率是　　　　　　　　　 。

(3)在上述F₁代中只考慮齒色這對性狀，假設(shè)這對性狀的遺傳屬X染色體伴性遺傳，則表現(xiàn)黃齒個體的性別是　　　 　　　，這一代中具有這種性別的個體基因是　　　　　 。

答案：

(1)標(biāo)記基因；原癌基因

(2)aaBB；AaBb；12/16(3/4)；4/16(1/4)

(3)雄性(♂)；X^BY、X^bY

解析：

(1)作為質(zhì)粒的一個條件之一就是要具有標(biāo)記基因，以檢測外源基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。

癌變的產(chǎn)生就是原癌基因由抑制態(tài)變激活態(tài)。

(2)根據(jù)題意AABb基因敲除小鼠的表現(xiàn)型是棕毛褐齒，現(xiàn)要得到白毛黃齒新類型小鼠(aabb)，應(yīng)選取用與AABb小鼠雜交的純合親本的基因型是，用圖解表示：

親本：AABb　X　―――

子代：aabb

則此親本必含有a基因，而又是純合的基因型只能為aabb或aaBB，而aabb是要培育的新品種不可能有，所以只用選用基因型為aaBB的親本，

親本：AABb　X　aaBB

子一代：1/2AaBb　 1/2 AaBB

F₁代中雙雜合基因型AaBb的雌雄小鼠相互交配即自交,由于是常染色體遺傳,即Bb自交后代的基因型及比例為:1/4BB、2/4Bb、1/4bb，帶有b基因個體的概率是3/4，不帶B基因個體的概率是1/4。(只考慮B和b這一對基因的計算，用基因分離定律)

也可兩對同時計算用自由組合定律，AaBb自交得1/4AAX1/4BB、1/4AAX2/4Bb、1/4AAX1/4bb、2/4AaX1/4BB、2/4AaX2/4Bb、24AaX1/4bb、1/4aaX1/4BB、1/4aaX2/4Bb、1/4aaX1/4bb、可得帶有b基因個體的概率是12/16，不帶B基因個體的概率是4/16。

(3)假設(shè)齒色性狀的遺傳屬X染色體伴性遺傳，則親本都為褐齒，基因型為X^BX^b　和　X^BY，則F₁代的基因型為X^BX^b、X^BX^B、X^BY、X^bY，其中X^bY為黃齒是雄性個體，雄性個體基因還有X^BY。　

此題考查學(xué)生對兩大遺傳定律的理解與掌握情況及基因工程的有關(guān)知識。　　

32.(09福建卷)(10分)

　　 轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點。請回答：

(1)構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時，應(yīng)選用限制酶　　　 ，對　　　 進(jìn)行切割。

(2)培養(yǎng)板中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長，欲利用該培養(yǎng)篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有　　　 　，作為標(biāo)記基因。

(3)香蕉組織細(xì)胞具有　　　　　　　 ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的　　　　 。

答案：

(1)PstⅠ、EcoRⅠ　 含抗病基因的DNA 、質(zhì)粒

(2)抗卡那霉素基因

(3)全能性　 脫分化、再分化

解析：本題考查基因工程的有關(guān)知識。

(1)從圖可看出，只有PstⅠ、EcoRⅠ兩種酶能保持抗病基因結(jié)構(gòu)的完整性，所以構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時，應(yīng)選用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ兩種酶，對抗病基因的DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割。

(2)卡那霉素能抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有抗卡那霉素基因，以此作為標(biāo)記基因。

(3)香蕉組織細(xì)胞具有全能性，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的脫分化和再分化。

8．(09天津卷)(30分)水稻種子中70%的磷以植酸形式存在。植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外，是多種動物的抗?fàn)I養(yǎng)因子，同時，排出的大量磷進(jìn)入水體易引起水華。

(1)磷元素除了形成植酸外，還可以出現(xiàn)在下列_____________分子或結(jié)構(gòu)中(多選)。

A.核糖　　　　　　 B.ATP　　　　　　　 C.核糖體　　　　　　　　 D.核膜

(2)種植蘆葦能有效抑制水華的發(fā)生，表明蘆葦與引起水華的藻類關(guān)系是_____________。

(3)植酸酶可降解植酸，在谷物類飼料中添加植酸酶可提高飼料的_____________　 利用率。

(4)酵母菌中植酸的活性較高。下圖是從不同類型酵母菌的發(fā)酵液中提取植酸酶的工藝流程。

據(jù)圖回答：

①植酸酶________________(Ⅰ/Ⅱ)屬于分泌蛋白。

②若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽鏈組成不同，其差異體現(xiàn)在______________________。

③提純的植酸酶需做活性條件測定。右圖為測定結(jié)果。

圖中的自變量可為____________________________(答一種)；

因變量可以通過測定______________________來表示。

(5)為從根本上解決水稻中的高植酸問題，可將植酸酶基因?qū)�入水稻，培育低植酸轉(zhuǎn)基因水稻品種。下圖是獲取植酸酶基因的流程。

據(jù)圖回答：

①圖中基因組文庫____________(小于/等于/大于)cDNA文庫。

②B過程需要的酶是______________；A、C過程中_____________(可以/不可以)使用同一種探針篩選含目的基因的菌株。

③目的基因Ⅰ和Ⅱ除從構(gòu)建的文庫中分離外，還可以分別利用圖中___________。和_____________為模板直接進(jìn)行PCR擴增，該過程中所用酶的顯著特點是_________________________。

(6)已獲得的轉(zhuǎn)植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感病，下圖為選育低植酸抗病水稻品種的過程。圖中兩對相對性形狀分別由兩對基因控制，并獨立遺傳。

　　 采用上圖育種過程，需從_______________代開始篩選，經(jīng)篩選淘汰后，在選留的植株中低植酸抗病純合體所占的比例是______________。選留植株多代自交，經(jīng)篩選可獲得低植酸抗病性狀穩(wěn)定的品性。

答案：

(1)BCD

(2)競爭關(guān)系

(3)營養(yǎng)成分

(4)①I

　　 ②氨基酸的種類、數(shù)量和排列順序不同

　　 ③溫度(或PH)　 單位時間內(nèi)植酸的降解量(或植酸降解產(chǎn)物的生成量)

(5)①大于

②逆轉(zhuǎn)錄酶　 可以

③DNA　　 cDNA耐高溫

(6)F₂　　　 1/9

解析：本題考查物質(zhì)的元素組成、生物的種間關(guān)系、蛋白質(zhì)、酶、基因工程、遺傳定律的相關(guān)知識，涉及的知識點較多，綜合性很強。(1)只有核糖中不含磷元素，ATP(磷酸基團(tuán))、核糖體(含RNA)、核膜(含磷脂)中均含有磷元素。(2)蘆葦能抑制水華的發(fā)生，表明蘆葦與水華的藻類關(guān)系是競爭。(3)植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外，是多種動物的抗?fàn)I養(yǎng)因子，而植酸酶可降解植酸，因此在谷物類飼料中添加植酸酶可提高飼料的營養(yǎng)成分的利用率。(4)分析圖可知，植酸酶Ⅱ需要經(jīng)過兩次離心，因此植酸酶Ⅰ屬于分泌蛋白。若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽鏈組成不同，其差異體現(xiàn)在氨基酸的種類、數(shù)量和排列順序的不同。從圖的可看出，自變量可為溫度或pH，因變量可以通過測定單位時間內(nèi)植酸的降解量或植酸降解量產(chǎn)物的生成量來表示。(5)分析獲取植酸酶基因的流程圖可知，圖中基因組文庫大于cDNA文庫。B過程需要的酶應(yīng)該是逆轉(zhuǎn)錄酶，因為A、C過程都能獲得含目的基因的菌株，所以可以使用同一種探針進(jìn)行篩選。目的基因Ⅰ和Ⅱ除從構(gòu)建的文庫中分離外，還可以分別利用圖中DNA和cDNA為模板直接進(jìn)行PCR擴增，該過程中所用酶的顯著特點是耐高溫。(6)根據(jù)上圖育種過程，所需性狀在F₂代中才開始出現(xiàn)，所以應(yīng)從F₂代開始篩選。從圖中可以看出，低植酸抗病是雙顯性(在F₂中占9/16)，經(jīng)篩選淘汰后，在選留的植株中純合體所占的比例是1/9。

2.(09重慶卷)下表有關(guān)基因表達(dá)的選項中，不可能的是

答案：D

解析：抗蟲棉葉肉細(xì)胞中存在細(xì)菌抗蟲蛋白基因，細(xì)菌抗蟲蛋白基因能夠表達(dá)產(chǎn)生細(xì)菌抗蟲蛋白；正常人皮膚細(xì)胞中含有人酪氨酸酶基因，人酪氨酸酶基因能夠表達(dá)產(chǎn)生人酪氨酸酶；大腸桿菌工程菌細(xì)胞存在動物胰島素基因，動物胰島素基因能夠表達(dá)產(chǎn)生動物胰島素；兔成熟紅細(xì)胞中無細(xì)胞核，所以無兔血紅蛋白基因不能表達(dá)產(chǎn)生兔血紅蛋白。此題為容易題，識記理解類。

(09上海理綜卷)20．科學(xué)家運用基因工程技術(shù)將人胰島素基因與大腸桿菌的質(zhì)粒DNA分子重組，并且在大腸桿菌體內(nèi)獲得成功表達(dá)。圖示a處為胰島素基因與大腸桿菌質(zhì)粒DNA結(jié)合的位置，它們彼此能結(jié)合的依據(jù)是

　　 A．基因自由組合定律　　　　　　　　　 B．半保留復(fù)制原則

　　 C．基因分離定律　　　　　　　　　　　 D．堿基互補配對原則

答案：D

解析：本題考查基因工程的相關(guān)知識，重組質(zhì)粒依據(jù)的是粘性末端的堿基互補配對原則。

45．(09廣東理基)錢永健先生因在研究綠色熒光蛋白方面的杰出成就而獲2008年諾貝爾獎。在某種生物中檢測不到綠色熒光，將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后，結(jié)果可以檢測到綠色熒光。由此可知

　　 A．該生物的基因型是雜合的

　　 B．該生物與水母有很近的親緣關(guān)系

　　 C．綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá)

　　 D．改變綠色熒光蛋白基因的1個核苷酸對，就不能檢測到綠色熒光

答案：C

解析：某種生物中檢測不到綠色熒光，將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后，結(jié)果可以檢測到綠色熒光，說明綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá)。

3．(09浙江卷)下列關(guān)于基因工程的敘述，錯誤的是

A．目的基因和受體細(xì)胞均可來自動、植物或微生物

B．限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶

C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性

D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)

答案：D

解析：基因工程中目的基因和受體細(xì)胞均可來自動、植物或微生物；常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性，只有經(jīng)過一定的物質(zhì)激活以后，才有生物活性。載體上的抗性基因主要是有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞，不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。所以D錯誤。

4．(09安徽卷)2008年諾貝爾化學(xué)獎授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白“的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個融合基因，再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是

A．追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過程

B．追蹤目的基因插入到染色體上的位置

C．追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布

D．追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)

答案：C

解析：將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個融合基因，將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)帶有綠色熒光，從而可以追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布。故C正確。