5、蘇云金桿菌（Bt）能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖（為抗氨芐青霉素基因），據(jù)圖回答下列問題。

（1）將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應(yīng)管中有          種DNA片段。

（2）圖中②表示 HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得      種重組質(zhì)粒；如果換用Bst l與BamHⅠ酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得          種重組質(zhì)粒。    

（3）目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的              。

（4）圖中③的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白，可以協(xié)助帶有目的基因的T—DNA導(dǎo)人植物細(xì)胞，并防止植物細(xì)胞中             對(duì)T—DNA的降解。

（5）已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對(duì)人類的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞                            。 

（6）生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的

                基因頻率的增長速率。

三、綜合題

（每空？ 分，共？ 分）

4、科學(xué)家運(yùn)用基因工程技術(shù)將人胰島素基因與大腸桿菌的

質(zhì)粒DNA分子重組，并且在大腸桿菌體內(nèi)獲得成功表

達(dá)。圖示a處為胰島素基因與大腸桿菌質(zhì)粒DNA結(jié)合

的位置，它們彼此能結(jié)合的依據(jù)是          （    ）

       A．基因自由組合定律                            

       B．半保留復(fù)制原則

       C．基因分離定律       

       D．堿基互補(bǔ)配對(duì)原則

二、填空題

（每空？ 分，共？ 分）

3、2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白“的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個(gè)融合基因，再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是                                                                                        （    ）

A．追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過程

B．追蹤目的基因插入到染色體上的位置

C．追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布

D．追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)

2、錢永健先生因在研究綠色熒光蛋白方面的杰出成就而獲2008年諾貝爾獎(jiǎng)。在某種生物中檢測(cè)不到綠色熒光，將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后，結(jié)果可以檢測(cè)到綠色熒光。由此可知           （    ）

    A．該生物的基因型是雜合的

    B．該生物與水母有很近的親緣關(guān)系

    C．綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá)

    D．改變綠色熒光蛋白基因的1個(gè)核苷酸對(duì)，就不能檢測(cè)到綠色熒光

1、下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是                                                                      （    ）

A．目的基因和受體細(xì)胞均可來自動(dòng)、植物或微生物

B．限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶

C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性

D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)

38、番茄營養(yǎng)豐富，是人們喜愛的一類果蔬。但普通番茄細(xì)胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制細(xì)胞產(chǎn)生多聚半乳糖醛酸酶，該酶能破壞細(xì)胞壁，使番茄軟化，不耐貯藏。為滿足人們的生產(chǎn)生活需要，科學(xué)家們通過基因工程技術(shù)，培育出了抗軟化、保鮮時(shí)間長的番茄新品種。（操作流程如圖）請(qǐng)回答：

（1）過程①需要的工具酶有                               。

（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，除了要在重組DNA中插入目的基因外，還需要有

                                                                  。

（3）提取目的基因采用的限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶的切點(diǎn)，請(qǐng)畫出目的基因兩側(cè)被限制酶切割后形成的黏性未端的過程示意圖。

                                                                      。

（4）在番茄新品種的培育過程中，將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法叫做             。

（5）從圖中可見，mRNA1和mRNA2的結(jié)合直接導(dǎo)致了                 無法合成，最終使番茄獲得了抗軟化的性狀。

（6）培養(yǎng)②、③為植物組織培養(yǎng)過程中的                          。

（7）上述轉(zhuǎn)基因番茄會(huì)通過花粉將抗多聚半乳糖醛酸酶基因傳播給其它植物而造成基因污染，原因是                                      ，請(qǐng)你提出一個(gè)上述轉(zhuǎn)基因工程的改良方案，以防止這樣的污染發(fā)生。

37、天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發(fā)酵原料的淀粉需經(jīng)一系列復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過程才能被利用。研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉(zhuǎn)人釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產(chǎn)生酒精。請(qǐng)回答下列問題：

   （1）將淀粉酶基因切割下來所用的工具是                  ，用                將淀粉酶基因與載體拼接成新的DNA分子，下一步將該DNA分子            ，以完成工程菌的構(gòu)建。

   （2）若要鑒定淀粉酶基因是否插人釀酒酵母菌，可采用的檢測(cè)方法是             ；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用                       檢測(cè)。將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時(shí)間后，加入碘液，工程菌周圍出現(xiàn)透明圈，請(qǐng)解釋該現(xiàn)象發(fā)生的原因。

（3）如何進(jìn)一步鑒定不同的轉(zhuǎn)基因工程菌菌株利用淀粉能力的大��？

（4）微生物在基因工程領(lǐng)域中有哪些重要作用？

36、目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒，pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。

（1）構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因，以便于                     。

（2）pBR32Z分子中有單個(gè)EcoRI限制酶作用位點(diǎn)，EcoR 1只能識(shí)別序列一GAATTC一，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)EcoRI的切點(diǎn)，請(qǐng)畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端。                    。

（3）pBR322分子中另有單個(gè)的BamHI限制酶作用位點(diǎn)，現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因，通過DNA連接酶作用恢復(fù)          鍵，成功的獲得了重組質(zhì)粒。說明                                      。

（4）為了檢測(cè)上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無amp^R和tet^R的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果（空圈表示與圖二對(duì)照無菌落的位置）。與圖三空圈相對(duì)應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是                 ，圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是                  。

五、綜合題

（每空？ 分，共？ 分）

35、糖尿病是一種常見病，且發(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì)。下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的操作過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答。

（1）過程②必需的酶是            酶。

（2）能否利用人的皮膚細(xì)胞來完成①的過程？       ，為什么？                                              

                                                                  。

（3）若A中共有a個(gè)堿基對(duì)，其中腺嘌呤有b個(gè)，則③④⑤過程連續(xù)進(jìn)行5次，至少需要提供鳥嘌呤         個(gè)。

（4）在利用AB獲得C的過程中，必須用                切割A(yù)和B，再加入                 ，才可以形成C。

（5）在進(jìn)行基因工程操作過程中，胰島素基因必需與運(yùn)載體——質(zhì)粒結(jié)合后才能進(jìn)入大腸桿菌體內(nèi)，并且在細(xì)菌內(nèi)增殖。質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)是一種                   。

（6）不同生物間基因的移植成功，說明生物共用一套                    。