33、以重組DNA技術(shù)為核心的基因工程正在改善著人類的生活。請(qǐng)回答下列問題：

（1）獲得目的基因的方法通常包括                和                     。

（2）切割和連接DNA分子所使用的酶分別是               和                。

（3）運(yùn)送目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體一般選用病毒或             ，后者的形狀成   。

（4）由于重組DNA分子成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的頻率          。所以在轉(zhuǎn)化后通常需要進(jìn)行             操作。

（5）將人胰島素基因分別導(dǎo)入大腸桿菌與酵母菌，從兩者生產(chǎn)的胰島素在功能和

        序列上是相同的。

32、降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科學(xué)機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素，從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個(gè)堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個(gè)堿基對(duì)形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補(bǔ)平，獲得雙鏈DNA，過程如下圖。

在此過程中發(fā)現(xiàn)，合成較長的核苷酸單鏈易產(chǎn)生缺失堿基的現(xiàn)象。分析回答下列問題：

（1）Klenow酶是一種________酶，合成的雙鏈DNA有________個(gè)堿基對(duì)。

（2）獲得的雙鏈DNA經(jīng)EcoRⅠ（識(shí)別序列和切割位點(diǎn)-G^↓AATTC-）和BamHⅠ（識(shí)別序列和切割位點(diǎn)-G^↓GATCC-）雙酶切后插入到大腸桿菌質(zhì)粒中，篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌并進(jìn)行DNA測序驗(yàn)證。

①大腸桿菌是理想的受體細(xì)胞，這是因?yàn)樗黖________________________。

②設(shè)計(jì)EcoRⅠ和BamHⅠ雙酶切的目的是___________________________。

③要進(jìn)行重組質(zhì)粒的鑒定和選擇，需要大腸桿菌質(zhì)粒中含有_______________。

（3）經(jīng)DNA測序表明，最初獲得的多個(gè)重組質(zhì)粒，均未發(fā)現(xiàn)完全正確的基因序列，最可能的原因是_______________。

（4）上述制備該新型降鈣素，運(yùn)用的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是____________________。

31、科學(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。但在進(jìn)行基因工程的操作過程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G^↓GATCC— ，限制酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—^↓GATC—，據(jù)圖回答：

（1）過程①表示的是采取                   的方法來獲取目的基因。

（2）根據(jù)圖示分析，在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，應(yīng)用限制酶         切割質(zhì)粒，用限制酶     酶切割目的基因。用限制酶切割目的基因和運(yùn)載體后形成的黏性末端通過          原則進(jìn)行連接。

   （3）人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，原因是             。

（4）人體的生長激素基因能在細(xì)菌體內(nèi)成功表達(dá)是因?yàn)?u>                  。

寫出目的基因?qū)�入�?xì)菌中表達(dá)的過程                                     。

（5）將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的，說明已導(dǎo)入了                  ，反之則沒有導(dǎo)入。

30、（多選）基因工程是現(xiàn)代育種技術(shù)中非常重要的一種手段，通過該技術(shù)課讓細(xì)菌生產(chǎn)人類的胰島素。以下相關(guān)說法正確的是                                                                                           （    ）

    A．人與細(xì)菌的DNA的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)相同         

    B．細(xì)菌與人類共用一套遺傳密碼

    C．能高效表達(dá)人胰島素基因的細(xì)菌是工程菌  

    D．基因工程育種可能存在生態(tài)安全問題

四、填空題

（每空？ 分，共？ 分）

29、（多選）關(guān)于限制性內(nèi)切酶的說法中，正確的是                                                 （    ）

    A．主要從真核生物中分離純化出來          

    B．能在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子

    C．對(duì)目的基因和運(yùn)載體必需用兩種特定的限制性內(nèi)切酶進(jìn)行切割，產(chǎn)生特定的黏性末

端

    D．一種限制性內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列

28、（多選）在基因工程中，作為基因運(yùn)輸工具的運(yùn)載體，必須具備的條件有             （    ）

A．能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制，并穩(wěn)定地保存    

B．具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)

C．必須是細(xì)菌的質(zhì)�；蚴删�體              

D．具有某些標(biāo)記基因

27、（多選）在判斷抗蟲基因是否成功轉(zhuǎn)入棉花基因組的方法中，屬于分子檢測的是（    ）

    A．通過觀察害蟲吃棉葉是否死亡

    B．檢測目的基因片段與DNA探針能否形成雜交帶

    C．檢測目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA與DNA探針能否形成雜交帶

    D．檢測目的基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)能否與特定抗體形成雜交帶

26、（多選）下列有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述中，不正確的是                                         （    ）

       A．在基因工程中將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞采用最多的方法是顯微注射技術(shù)

       B．轉(zhuǎn)基因生物可能會(huì)影響到生物多樣性

       C．細(xì)胞株和細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)相同

       D．單克隆抗體的制備過程體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性

25、（多選）關(guān)于限制性內(nèi)切酶的說法中，正確的是　　　　　　　　　　　　          （    ）

       A．主要從真核生物中分離純化出來

       B．能在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子

       C．對(duì)目的基因和運(yùn)載體必需用兩種特定的限制性內(nèi)切酶進(jìn)行切割，產(chǎn)生特定的黏性末端

       D．一種限制性內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列

24、據(jù)統(tǒng)計(jì)，從20世紀(jì)90年代至今，全世界包括基因制藥在內(nèi)的生物技術(shù)藥物的銷售額，以年均30%的速度增長，生物制藥已成為21世紀(jì)的朝陽產(chǎn)業(yè)。下列有關(guān)說法不正確的是                                                       （    ）

       A．我們可以利用轉(zhuǎn)基因工程技術(shù)使哺乳動(dòng)物本身變成“批量生產(chǎn)藥物的工廠”

       B．對(duì)于基因制藥，我們應(yīng)該科學(xué)的認(rèn)識(shí)和評(píng)估，保障公眾的知情權(quán)

       C．利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)還可以進(jìn)行基因治療，現(xiàn)在技術(shù)已經(jīng)完全成熟

       D．由于轉(zhuǎn)基因生物的安全問題，國家應(yīng)建立相應(yīng)的評(píng)估及預(yù)警機(jī)制

三、多項(xiàng)選擇

（每空？ 分，共？ 分）