34、下圖為利用生物技術獲得生物新品種的過程．據圖回答：

（1） 在基因工程中．A→B為____________技術。利用的原理是_______________，其中a為：_______________的過程，b過程使用的酶是___________________。

（2）B→C為轉基因綿羊的培育過程，c過程用到的生物技術主要有動物細胞培養(yǎng)和______________技術．在動物細胞培養(yǎng)過程中，需讓培養(yǎng)液中含有—定量的CO₂，其主要作用是_______________________。

（3）B→—D為抗蟲棉的培育過程，其中d過程常用的方法是__________________，要確定目的基因（抗蟲基因）導入受體細胞后是否能穩(wěn)定遺傳并表達，需進行檢測和鑒定工作。請寫出在個體水平上的鑒定或方法過程：__________________________。

33、以重組DNA技術為核心的基因工程正在改善著人類的生活。請回答下列問題：

（1）獲得目的基因的方法通常包括                和                     。

（2）切割和連接DNA分子所使用的酶分別是               和                。

（3）運送目的基因進入受體細胞的載體一般選用病毒或             ，后者的形狀成   。

（4）由于重組DNA分子成功導入受體細胞的頻率          。所以在轉化后通常需要進行             操作。

（5）將人胰島素基因分別導入大腸桿菌與酵母菌，從兩者生產的胰島素在功能和

        序列上是相同的。

32、降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質疏松癥等。人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科學機構為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素，從預期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補平，獲得雙鏈DNA，過程如下圖。

在此過程中發(fā)現，合成較長的核苷酸單鏈易產生缺失堿基的現象。分析回答下列問題：

（1）Klenow酶是一種________酶，合成的雙鏈DNA有________個堿基對。

（2）獲得的雙鏈DNA經EcoRⅠ（識別序列和切割位點-G^↓AATTC-）和BamHⅠ（識別序列和切割位點-G^↓GATCC-）雙酶切后插入到大腸桿菌質粒中，篩選含重組質粒的大腸桿菌并進行DNA測序驗證。

①大腸桿菌是理想的受體細胞，這是因為它_________________________。

②設計EcoRⅠ和BamHⅠ雙酶切的目的是___________________________。

③要進行重組質粒的鑒定和選擇，需要大腸桿菌質粒中含有_______________。

（3）經DNA測序表明，最初獲得的多個重組質粒，均未發(fā)現完全正確的基因序列，最可能的原因是_______________。

（4）上述制備該新型降鈣素，運用的現代生物工程技術是____________________。

31、科學家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達。但在進行基因工程的操作過程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，便于重組和篩選。已知限制酶I的識別序列和切點是—G^↓GATCC— ，限制酶II的識別序列和切點是—^↓GATC—，據圖回答：

（1）過程①表示的是采取                   的方法來獲取目的基因。

（2）根據圖示分析，在構建基因表達載體過程中，應用限制酶         切割質粒，用限制酶     酶切割目的基因。用限制酶切割目的基因和運載體后形成的黏性末端通過          原則進行連接。

   （3）人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進行重組，原因是             。

（4）人體的生長激素基因能在細菌體內成功表達是因為                  。

寫出目的基因導入細菌中表達的過程                                     。

（5）將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的，說明已導入了                  ，反之則沒有導入。

30、（多選）基因工程是現代育種技術中非常重要的一種手段，通過該技術課讓細菌生產人類的胰島素。以下相關說法正確的是                                                                                           （    ）

    A．人與細菌的DNA的結構基礎相同         

    B．細菌與人類共用一套遺傳密碼

    C．能高效表達人胰島素基因的細菌是工程菌  

    D．基因工程育種可能存在生態(tài)安全問題

四、填空題

（每空？ 分，共？ 分）

29、（多選）關于限制性內切酶的說法中，正確的是                                                 （    ）

    A．主要從真核生物中分離純化出來          

    B．能在特定的位點上切割DNA分子

    C．對目的基因和運載體必需用兩種特定的限制性內切酶進行切割，產生特定的黏性末

端

    D．一種限制性內切酶只能識別一種特定的核苷酸序列

28、（多選）在基因工程中，作為基因運輸工具的運載體，必須具備的條件有             （    ）

A．能夠在宿主細胞中復制，并穩(wěn)定地保存    

B．具有多個限制酶切點

C．必須是細菌的質�；蚴删�體              

D．具有某些標記基因

27、（多選）在判斷抗蟲基因是否成功轉入棉花基因組的方法中，屬于分子檢測的是（    ）

    A．通過觀察害蟲吃棉葉是否死亡

    B．檢測目的基因片段與DNA探針能否形成雜交帶

    C．檢測目的基因轉錄形成的mRNA與DNA探針能否形成雜交帶

    D．檢測目的基因表達產物蛋白質能否與特定抗體形成雜交帶

26、（多選）下列有關現代生物技術的敘述中，不正確的是                                         （    ）

       A．在基因工程中將目的基因導入植物細胞采用最多的方法是顯微注射技術

       B．轉基因生物可能會影響到生物多樣性

       C．細胞株和細胞系的遺傳物質相同

       D．單克隆抗體的制備過程體現了動物細胞的全能性

25、（多選）關于限制性內切酶的說法中，正確的是　　　　　　　　　　　　          （    ）

       A．主要從真核生物中分離純化出來

       B．能在特定的位點上切割DNA分子

       C．對目的基因和運載體必需用兩種特定的限制性內切酶進行切割，產生特定的黏性末端

       D．一種限制性內切酶只能識別一種特定的核苷酸序列