Question

7．科學家發(fā)現(xiàn)家蠅體內存在一種抗腫瘤蛋白（且具有抗菌能力）．這種蛋白質具有極強的抗菌能力，受到研究者重視．若臨床使用發(fā)現(xiàn)此蛋白質對腫瘤確良好的療效，可以通過基因工程技術導入大腸桿菌內進行大量生產．其過程大體如圖1：

（1）在基因工程中，獲取目的基因的方法有人工合成、PCR擴增．
（2）酶切此家蠅DNA分子和酶切質粒時，所用的限制酶可以不同，但是產生的粘性末端要滿足粘性末端能完全互補條件．
（3）將抗腫瘤基因導入大腸桿菌，并在大腸桿菌細胞內成功表達產生了抗腫瘤蛋白，由于繁殖快、產量較高，因此在短時間內就能獲得大量的抗腫瘤蛋白．
（4）細胞工程也可以將抗腫瘤蛋白臨床使用，下面是單克隆抗體制備過程示意圖，請據圖2回答：
①圖中A過程從小鼠的脾臟中取得的“小鼠細胞”是B淋巴（漿）細胞，要獲得能產生抗腫瘤蛋白抗體的雜交瘤細胞至少要經過2次篩選．從小鼠體內提取分離該細胞之前，給小鼠注射的特定的物質是（特異性）抗原．
②圖中B過程是細胞融合，該過程需要用滅活的病毒（或仙臺病毒）、聚乙二醇或電激等誘導．

Answer 1

分析 單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細胞與漿細胞結合，經過選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細胞并經專一抗體檢測后，培養(yǎng)能產生特定抗體的雜交瘤細胞即可得單克隆抗體，涉及動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合技術；雜交瘤細胞集合了兩個細胞的遺傳物質，但不一定全部表達；單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，具有準確、快速等優(yōu)點．

解答 解：（1）在基因工程中，獲取目的基因的方法有從基因文庫中獲取目的基因、PCR擴增目的基因、人工合成目的基因．
（2）基因表達載體的構建過程，需要DNA連接酶將目的基因與運載體連接起來，所以兩者需要相同的黏性末端且能完全互補．
（3）選用大腸桿菌作為受體細胞，原因是：繁殖速度快，可以在短時間內獲得要表達的蛋白質．
（4）①單克隆抗體的制備過程中，采用的是已免疫的小鼠B細胞（漿細胞或效應B細胞），即經過注射特異性抗原，然后和骨髓瘤細胞的融合，需要經過至少兩次篩選（第一次篩選獲得雜交瘤細胞，第二次篩選獲得能產生抗體的雜交瘤細胞），最終篩選出來的雜交瘤細胞．
②圖中B過程是細胞融合，該過程需要用滅活的病毒（或仙臺病毒）、聚乙二醇或電激等誘導．
故答案為：
（1）人工合成   PCR擴增          
（2）粘性末端能完全互補
（3）繁殖快、產量較高
（4）①B淋巴（漿）   2     （特異性）抗原 ②病毒（或仙臺病毒）

點評 本題結合圖解，考查基因工程和細胞工程的相關知識，要求考生識記基因工程的操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細節(jié)；識記單克隆抗體的制備過程，能結合圖解準確答題．