Question

據(jù)報(bào)道，番茄紅素具有一定的防癌效果，科學(xué)家將含有酵母S-腺苷基蛋氨酸脫羧酶基因（簡(jiǎn)稱(chēng)s基因）cDNA片段導(dǎo)入普通番茄植株，培育了番茄紅素高的新品種．
（1）獲取cDNA片段的方法常采用

 

．
（2）為確保S基因在番茄中表達(dá)，構(gòu)建的表達(dá)載體含有S基因及其啟動(dòng)子等，其中啟動(dòng)子的作用是

 

．為了檢測(cè)S基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可用標(biāo)記的

 

作探針與mRNA雜交，該技術(shù)一般稱(chēng)為分子雜交技術(shù)．
（3）假設(shè)S基因的一條鏈A和T的量為2400個(gè)，A和T的總量占該片段總堿基的60%，用PCR擴(kuò)增該基因，該基因復(fù)制n次共要dGTP

 

個(gè)．
（4）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和

 

等．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專(zhuān)題：

分析：以mRNA為模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA．
啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．
DNA分子雜交技術(shù)是將轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNA提取出來(lái)，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作標(biāo)記，以此作為探針

解答： 解：（1）獲取cDNA的方法是逆轉(zhuǎn)錄法．
（2）啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，可驅(qū)動(dòng)S基因轉(zhuǎn)錄出mRNA．檢測(cè)S基因的mRNA，所以基因探針是S基因的片段．
（3）一條鏈A和T的量為2400個(gè)，所以A與T總量為4800，A和T的總量占該片段總堿基的60%，可求得該片段中G有1600個(gè)，故基因復(fù)制n次共要dGTP1600×（2ⁿ-1）個(gè)．
（4）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄法  
（2）驅(qū)動(dòng)S基因轉(zhuǎn)錄出mRNA   S基因片段
（3）1600×（2ⁿ-1）
（4）花粉管通道法（基因槍法）

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生識(shí)記cDNA的獲取，啟動(dòng)子的作用和目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法．