Question

12．Ⅰ．細菌常被應用于生產(chǎn)生活中，如有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同學欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的細菌．
（1）在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上．為篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍清晰區(qū)域的大�。�一般情況下，如圖中清晰區(qū)域越大說明該菌株的降解能力強．
Ⅱ．另一同學將第一步篩選得到的甲、乙、丙三種細菌分別接種到A、B、C三種培養(yǎng)液中，經(jīng)培養(yǎng)后分別測得它們繁殖一代所需的時間，結果如表所示：

培養(yǎng)液成分	繁殖一代所需的時間（分鐘）
	甲	乙	丙
A．葡萄糖、NaCl、PO43-、MgSO4	43	100	-
B．葡萄糖、NaCl、PO43-、MgSO4、8種氨基酸	28	40	-
C．葡萄糖、NaCl、PO43-、MgSO4、19種氨基酸	25	25	80

注：“-”表示細菌沒有生長．
（2）在A培養(yǎng)基中增殖較快的細菌是甲．丙細菌可以在C培養(yǎng)液中繁殖卻無法在B培養(yǎng)液中繁殖，原因是B培養(yǎng)液中缺乏丙細菌生長所必需的氨基酸．
（3）由于微生物的營養(yǎng)類型復雜，不同的微生物對營養(yǎng)物質的需求是不同的．如果培養(yǎng)能進行光合作用的微生物，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質是B、D、E（多選題），
A．碳源    B．氮源    C．生長因子    D．無機鹽     E．水
Ⅲ．下面是有關某細菌G的四項實驗：
實驗1：將G接種于一般培養(yǎng)基上，結果出現(xiàn)菌落．
實驗2：用一定劑量的紫外線處理G，產(chǎn)生突變種g1．將g1接種于一般培養(yǎng)基后，不出現(xiàn)菌落；但在培養(yǎng)基內(nèi)添加營養(yǎng)物質甲后，就出現(xiàn)菌落．
實驗3：用另一劑量的紫外線處理G，得突變種g2，將g2接種于一般培養(yǎng)基后，也不出現(xiàn)菌落；但在培養(yǎng)基內(nèi)添加營養(yǎng)物質乙后，就出現(xiàn)菌落．
實驗4：將g1和g2一起接種于一般培養(yǎng)基上，數(shù)日后出現(xiàn)菌落．
（4）細菌g1和g2分別接種于一般培養(yǎng)基，均不能生長．其原因是用紫外線處理導致細菌G發(fā)生了A，從而缺乏合成營養(yǎng)物質甲或乙的酶．
A．基因突變     B．基因重組     C．染色體畸變     D．不可遺傳變異
（5）實驗1至3表明，物質甲和乙均是細菌G在代謝過程中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物．在實驗2和3 中，它們是作為C加入一般培養(yǎng)基的．
A．碳源     B．氮源        C．生長因子      D．無機鹽
（6）實驗4中出現(xiàn)菌落的原因可能是細菌g₁能夠合成營養(yǎng)物質乙，細菌g₂能夠合成營養(yǎng)物質甲，因此一起培養(yǎng)可以互相支持保證必須的營養(yǎng)要素．

Answer 1

分析 解答本題需掌握：
1．培養(yǎng)基的概念、種類及營養(yǎng)構成
（1）概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質．

（3）營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求．
2．無菌技術
（1）關鍵：防止外來雜菌的入侵．
（2）具體操作
①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒．
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌．
③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行．
④實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸．
3、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板．
4、接種方法：平板劃線法和稀釋涂布法．

解答 解：（1）從實驗目的欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的細菌，可以得出該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基的成分應以原油為唯一碳源．細菌可分解原油，分解能力越強，形成的透明圈越大，透明度越高，一般清晰區(qū)域越大說明該菌株的降解能力強．
（2）觀察題圖表格可以看出在A培養(yǎng)基中，能生長的細菌是甲和乙，甲繁殖一代需要的時間短，所以增殖較快．比較B、C培養(yǎng)基的成分可知，C培養(yǎng)基的氨基酸的種類比B培養(yǎng)基多，所以丙細菌可以在C培養(yǎng)液中繁殖卻無法在B培養(yǎng)液中繁殖，原因可能是B培養(yǎng)液中缺乏丙細菌生長所必需的氨基酸．
（3）如果培養(yǎng)能進行光合作用的微生物，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質中不需要添加碳源和生長因子．
（4）分析資料可知紫外線照射后發(fā)生了基因突變，突變后的g1不能合成甲物質，突變后的g2不能合成乙物質．所以細菌g₁和g₂分別接種于一般培養(yǎng)基，均不能生長．其原因是用紫外線處理導致細菌G發(fā)生了基因突變，從而缺乏合成營養(yǎng)物質甲或乙的酶．
（5）實驗1至3表明，物質甲和乙均是細菌G在代謝過程中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物．在實驗2和3中，它們是作為生長因子加入一般培養(yǎng)基的．
（6）實驗4中出現(xiàn)菌落的原因可能是細菌g₁能夠合成營養(yǎng)物質乙，g₂能夠合成營養(yǎng)物質甲，因此一起培養(yǎng)可以互相支持保證必須的營養(yǎng)要素．
故答案為：
（1）原油    該菌株的降解能力強
（2）甲     B培養(yǎng)液中缺乏丙細菌生長所必需的氨基酸
（3）B、D、E
（4）A
（5）C
（6）細菌g₁能夠合成營養(yǎng)物質乙，細菌g₂能夠合成營養(yǎng)物質甲，因此一起培養(yǎng)可以互相支持保證必須的營養(yǎng)要素

點評 本題考查了選擇培養(yǎng)基、微生物培養(yǎng)的環(huán)境條件和微生物培養(yǎng)的營養(yǎng)條件等知識，主要考查學生分析實驗結果獲取有效信息，并分析利用有效信息獲取結論的能力．